多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌

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建立了多重聚合酶链反应(multiplex PCR)检测产气荚膜梭菌的α-毒素和肠毒素(enterotoxin)基因.该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌.首先猪粪便样品经前处理后,接种选择性培养基,再挑取单个菌落溶于超纯水中,煮沸提抽,制备样品DNA,进行PCR检测.从实验中我们成功的扩增出324bp的α毒素基因片段和233bp的肠毒素基因片段.以人工污染样品10倍系例稀释后进行检测,该方法的检测灵敏度达到1.0×104CFU/g并对58份猪粪便样品检测,获得53株产气荚膜
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