【摘 要】
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建立了反相色谱法样品前处理与正相酰胺柱色谱分离相结合的正相高效液相色谱荧光(HPLC-FLU)法同时测定乳粉中α-、β-、γ-和δ-生育酚的含量,用于乳粉中维生素E含量的准确测
【机 构】
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台州科技职业学院农业与生物工程学院,浙江台州318020;中国科学院生物物理研究所,北京100101
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建立了反相色谱法样品前处理与正相酰胺柱色谱分离相结合的正相高效液相色谱荧光(HPLC-FLU)法同时测定乳粉中α-、β-、γ-和δ-生育酚的含量,用于乳粉中维生素E含量的准确测定.考察了不同色谱柱类型、不同流动相比例和不同进样量对4种生育酚的色谱分离情况.2.5 g乳粉样品经氢氧化钾碱性溶液皂化后,用石油醚-乙醚混合液提取浓缩至近干,用甲醇定容至10 mL,经过滤膜后进样.以K(正己烷):v(叔丁基甲基醚):v(四氢呋喃):v(甲醇)= 810.0:85.3:104.3:0.4的混合溶液为流动相等度洗脱,α-、β-、γ-、δ-生育酚在酰胺柱上18.5 min内达到基线分离.激发波长λx = 294 nm,发射波长Am = 328 nmn,进样体积为2 jxL.4种生育酚在2- 80 mg/L范围内,相关系数R2 >0.999 1;4种生育rn酚的定量限均为0.6 mg/kg,3水平加标平均回收率范围为88.2％-103.0％,相对标准偏差范围为1.3％～4.7％.方法色谱分离效果好、重复性好、准确度高、定量限也满足标准限量要求,具有较好的实用性,并已用于实际样品的检测,可为乳粉维生素E含量的准确测定提供技术参考.
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