糖尿病视网膜病变中组蛋白3乙酰化参与乙酰肝素酶调控VEGF基因转录的初步研究

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目的 研究高糖诱导人视网膜血管内皮细胞(HRECs)中组蛋白3乙酰化(H3ac)、乙酰肝素酶(HPA)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性,明确一种或多种能够参与HPA上调VEGF表达的H3乙酰化赖氨酸残基.方法 实验研究.在中山大学中山眼科中心将该实验分为两组,正常组和高糖组(葡萄糖含量30mmol/L).免疫荧光染色法观察两组H3乙酰化赖氨酸残基9(H3K9ac)、H3K14ac、H3K18ac、H3K27ac和H3K56ac在HRECs的表达定位.蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测两组间HPA、VEGF和各H3乙酰化赖氨酸残基的蛋白表达变化.结果 免疫荧光染色结果显示,高糖组HRECs细胞核中各H3乙酰化赖氨酸残基的荧光较正常组增强.Western blot检测结果示,与正常组相比,高糖组中HPA、VEGF、H3K9ac和H3K14ac的蛋白表达均有明显升高,差异有统计学意义(PHPA=0.016,PVEGF=0.014,PH3K9ac=0.027,PH3K14ac=0.045).结论 高糖诱导的HRECs中,H3乙酰化在HPA参与VEGF基因转录调控的过程中发挥作用,并且从蛋白水平证实乙酰化发生在H3K9和H3K14。

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