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目的
了解银杏内酯B(GKB)对癫痫大鼠海马中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)与磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的影响,并探讨在这个过程中两者之间可能存在的关系。
方法21日龄SD大鼠96只随机分为5组:生理盐水组(NS组)、戊四氮(PTZ)致癫痫持续状态(SE)模型组(P组)、GKB治疗组(G+P组)、GKB治疗+PI3K抑制剂wortmannin干预组(G+P+W组)、wortmannin干预组(P+W组)。于G+P组建模后1 h、4 h、8 h、24 h,其他组建模后4 h、8 h处死大鼠取出脑组织,应用免疫组化方法及Western blot检测HIF-1α、p-Akt蛋白的表达。
结果(1) G+P组1 h、4 h、8 h、24 h各时间点比较p-Akt蛋白表达差异有统计学意义(P<0.01),4 h表达达高峰(0.85±0.03);同时各时间点的HIF-1α蛋白表达差异有统计学意义(P<0.01),8 h表达达高峰(1.00±0.13)。(2)8 h时间点各组间HIF-1α比较:NS组有少量表达,P组、G+P组表达量较NS组均明显升高(P<0.01),且G+P组表达量高于P组(P<0.01),G+P+W组、P+W组表达量明显降低,但G+P+W组高于P+W组(P<0.01)。(3)4 h时间点各组间p-Akt比较:NS组有少量表达,P组、G+P组表达量较NS组均明显升高,且G+P组表达量高于P组(P<0.01),G+P+W组、P+W组表达量均明显降低。
结论在银杏内酯B作用下,癫痫持续状态大鼠海马内PI3K/Akt信号通路受到激活,并参与了海马内HIF-1α表达的调控。