Tumstatin—EGFP真核表达载体构建及稳定转染CHO细胞系的建立

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【摘要】

：

目的构建重组tuinstatin-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的分泌型真核表达载体质粒，建立稳定转染的中国仓鼠卵巢细胞系（CHO-K1）。方法利用重叠多聚酶链反应（PCR）技术从pGEM—T／STL质粒和pE

【作者】

：

姚丽娟罗以勤孔建新赵亮常珍濮跃晨马筱玲

【机构】

：

安徽医科大学附属省立医院

【出处】

：

山东医药

【发表日期】

：

2008年34期

【关键词】

：

肿瘤抑素增强型绿色荧光蛋白融合蛋白表达载体 tumstatin EGFP fusion protein espression vectors

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目的构建重组tuinstatin-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的分泌型真核表达载体质粒，建立稳定转染的中国仓鼠卵巢细胞系（CHO-K1）。方法利用重叠多聚酶链反应（PCR）技术从pGEM—T／STL质粒和pEGFP—C2质粒中扩增出STL-EGFP，用DNA重组技术将片段定向插入pIRESneo3质粒中，经酶切和序列验证正确后，用lipo—fectamine2000转染CHO-K1细胞，通过G418筛选建立稳定转染的CHO细胞系，用逆转录-PCR、Westernblot检测tumstatin—EGFP的

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