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目的
探讨小檗碱对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖及凋亡相关信号通路中Bax与Bcl-2表达的影响。
方法体外培养A431细胞，分别用含12.5、25、50、100 mg/L小檗碱的培养液（实验组）、含250 mg/L顺铂的培养液（阳性对照组）、正常培养液（空白对照组）作用于A431细胞12、24、48、72 h后，用噻唑蓝（MTT）法测定小檗碱对A431细胞生长的抑制作用；倒置显微镜观察小檗碱作用后细胞形态学改变；实时定量RT-PCR法检测小檗碱对A431细胞Bax和Bcl-2基因表达的影响；免疫荧光法分析Bax和Bcl-2的表达情况。采用SPSS 13.0软件进行多因素方差分析。
结果MTT结果显示，小檗碱对A431细胞的生长抑制作用随作用时间的延长而增强（F=510.927，P<0.001），随浓度的增加而增强（F=1118.312，P<0.001），小檗碱浓度与作用时间的交互作用有统计学意义（F=70.239，P<0.001），表明不同浓度小檗碱组各时间点的变化趋势不完全一致。倒置显微镜下可见，随着药物浓度增加，A431细胞密度减少，由多角形变为圆顿皱缩。实时定量RT-PCR结果表明，小檗碱作用后，随着时间或浓度的增加，Bax/Bcl-2 mRNA相对表达量增加，同一浓度小檗碱（25、50、100 mg/L）作用4、8、12 h组间比较，差异均有统计学意义（F=226.231、1 300.636、4 325.139，P<0.001）。免疫荧光染色显示，小檗碱作用后A431细胞内Bax荧光增强，而Bcl-2减弱。
结论小檗碱对A431细胞的生长抑制作用呈时间和浓度依赖性，Bax和Bcl-2的表达改变可能是小檗碱诱导A431细胞凋亡的途径之一。