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目的通过定点突变,提高融合蛋白HSA—hGCSF的生物活性。方法结构模拟显示,对hG—CSF中5个氨基酸残基加以突变可以提高其生物活性。通过限制性酶切方法将该突变基因与HSA基因的3’连接,融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1之后,重组质粒pPIC9K.HSA—hG-CSFm经SalI线性化,电击转化毕赤酵母GS115,摇瓶中进行分泌表达。用MTF比色法测定发酵液上清中融合蛋白的hG—CSF活性。结果PCR鉴定得到约为2300bp的融合基因,测序结果正确。SDS—PAGE