Real-time PCR快速检测钩端螺旋体方法的建立

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目的:采用新型TaqMan探针建立检测钩端螺旋体的实时荧光定量PCR。方法:根据钩端螺旋体16s rDNA设计的一对引物及探针,以钩体标准菌株的核酸为模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7500)建立实时荧光定量PCR。结果:建立的定量标准曲线的循环CT值与模板拷贝数呈现良好的线性关系(r=0.998),与普通PCR相比,荧光PCR的灵敏度是其1000倍,检测其他细菌DNA,未检测到信号。结论:本研究中检测钩端螺旋体的实时荧光定量PCR具有高度的特异性和敏感性,特别适合检测样本中微量的钩端螺旋体。
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