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目的：制备并鉴定携带小鼠神经生长因子前导肽（PN）和人内吗啡肽-2（EM-2）融合基因的重组非增殖型腺病毒。方法：PN—EM-2目的基因经酶切插入pAxCAwt载体，构建PN—EM-2-pAxCAwt重组黏粒，脂质体转染293细胞获取重组腺病毒。PCR鉴定后扩增不含野生型病毒的阳性克隆并纯化，采用TCID50法测定病毒滴度；体外感染NIH3T3细胞观察转基因的表达，酶联免疫反应（EIA）法测定表达产物浓度。结果：融合基因序列正确，PCR可检测到401bp的融合基因条带并排除野生病毒株，腺病毒Ad—PN—E