【摘 要】
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目的 通过体内实验探讨外源性p53上调凋亡调控因子(PUMA)对人类脑胶质瘤细胞生长的影响及其增强胶质瘤细胞对替莫唑胺(TMZ)敏感性的机制.方法 建立人类脑胶质瘤细胞株U87MG裸
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目的 通过体内实验探讨外源性p53上调凋亡调控因子(PUMA)对人类脑胶质瘤细胞生长的影响及其增强胶质瘤细胞对替莫唑胺(TMZ)敏感性的机制.方法 建立人类脑胶质瘤细胞株U87MG裸鼠皮下移植瘤模型,将胶质瘤裸鼠用随机区组法随机分为四组,于建模2周后,分别自腹腔注射0.9%NaCl溶液100μl(对照组)、2×108 pfu/100μl Ad-PUMA(PUMA组)、TMZ 10 mg/kg(TMZ组)和2×108 pfu/100μl Ad-PUMA+TMZ 10 mg/kg(联合组),每组8只.治疗20d后处死裸鼠,剖腹测量原位肿瘤体积、抑瘤率.TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况及计算凋亡指数(AI).半定量RT-PCR和Western blot法检测DNA损伤修复蛋白6-氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)mRNA和MGMT蛋白表达情况.结果 治疗20 d时对照组、PUMA组、TMZ组、联合组诱发肿瘤瘤体积分别为(3.68±0.09)、(2.63±0.13)、(2.13±0.07)、(0.97±0.02)cm3,四组体积进行两两比较差异有统计学意义(P均＜0.05).治疗组抑瘤率分别为28.5%、42.1%、73.6%,两两比较差异有统计学意义(P均＜0.05).TUNEL染色并计算AI:对照组(2.0±1.2)%、Ad-PUMA组(11.4±2.6)%、TMZ组(7.6±3.2)%、联合组(20.6±8.6)%,进行两两比较差异有统计学意义(P均＜0.05).半定量RT-PCR和Western blot法检测显示MGMTmRNA和MGMT蛋白在TMZ组中表达最高,与其他三组比较差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 Ad-PUMA联合TMZ具有协同抑制胶质瘤生长作用,其机制可能与Ad-PUMA促进凋亡和抑制MGMT表达有关.
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