基于网络药理学预测，结合动物实验验证以阐明牛黄治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的潜在作用及机制。运用BATMAN-TCM等数据库挖掘牛黄抗UC的潜在靶点，并进行通路富集分析。70只C57BL/6J小鼠随机分为空白组，模型组，溶剂模型（2%聚山梨酯80）组，柳氮磺胺吡啶(SASP，0.40 g·kg-1)组，体外培育牛黄（Bovis Calculus sativus，BCS）0.20、0.10、0.05 g·kg-1组共7组。3%葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium，DSS）水溶液自由饮用7 d建立UC小鼠模型，各给药组采用灌胃预给药3 d，边造模边给药7 d（连续给药10 d）。观察小鼠体质量，记录疾病活动指数（disease activity index，DAI）评分分值。造模7 d后，测量结肠长度，苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化，酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠结肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-17（IL-17）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测IL-17、IL-17RA、Act1、TRAF2、TRAF5 、TNF-α、IL-6、IL-1β、CXCL1、CXCL2 及CXCL10 mRNA的表达水平，Western blot法检测IL-17、IL-17RA、Act1、p-p38 MAPK、p-ERK1/2蛋白的表达。网络药理学预测结果显示，牛黄可能通过IL-17信号通路、TNF信号通路等发挥治疗作用。动物实验结果显示，给药第10天，与溶剂模型组比较，BCS 3个剂量组均能显著增加体质量，降低DAI评分，增加结肠长度，改善结肠黏膜病理损伤，并能显著抑制结肠组织TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17表达量。BCS 0.20 g·kg-1组可显著降低UC模型小鼠结肠组织中IL-17、Act1、TRAF2、TRAF5、TNF-α、IL-6、IL-1β、CXCL1及CXCL2 mRNA 的表达水平，有下调IL-17RA 及CXCL10 mRNA表达水平的趋势；还能显著抑制IL-17RA、Act1、p-ERK1/2蛋白表达，有降低IL-17、p-p38 MAPK蛋白表达的趋势。首次从整体-器官-组织-分子水平，揭示了体外培育牛黄可能通过抑制IL-17/IL-7RA/Act1信号通路，降低促炎细胞因子和趋化因子的表达，从而改善DSS诱导的UC小鼠结肠组织炎症损伤，发挥“清热解毒”功效。