【摘 要】
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根据已发表的番鸭细小病毒（MDPV）核苷酸序列设计并合成1对引物,对MDPV非结构蛋白NS2基因进行扩增。所获得的PCR产物与预期片段大小相符,约1.4 kb。将该片段直接与pMD18-T载体连
【机 构】
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广东大华农动物保健品股份有限公司,华南农业大学兽医学院,华南农业大学动物科学学院
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根据已发表的番鸭细小病毒（MDPV）核苷酸序列设计并合成1对引物,对MDPV非结构蛋白NS2基因进行扩增。所获得的PCR产物与预期片段大小相符,约1.4 kb。将该片段直接与pMD18-T载体连接,转化入感受态大肠杆菌DH5α中增殖。在对所提质粒进行快速鉴定、PCR扩增及BamHI酶切线性化初步鉴定的基础上,经限制性内切酶BamHI和SalI进行双酶切鉴定。将克隆产物pMD18-T-NS2与原核表达载体pET-32a分别用BamHI和SalI双酶切后,回收目的片段进行定向连接,并转化入感受态大肠杆菌DH5
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