【摘 要】
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以毕赤酵母密码子为基准,对短小芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因密码子进行优化,设计合成全基因序列,构建表达载体转入毕赤酵母中。结果表明,短小芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因已成功
【基金项目】
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安徽高校自然科学研究重点项目（编号：KJ2016A878）;安徽省教育厅质量工程项目（编号：2016sxzx036）;安徽省自然科学基金青年项目（编号：1308085QC48）
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以毕赤酵母密码子为基准,对短小芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因密码子进行优化,设计合成全基因序列,构建表达载体转入毕赤酵母中。结果表明,短小芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因已成功转入酵母菌中并分泌表达,诱导培养72 h发酵液的酶活力可达25.39 U/mL。重组酶最适反应温度45℃,最适pH 9.0,重组酶的K m值1.26 mmol/L,V max为32.15μmol/(min·mg)。重组β-葡萄糖苷酶对大豆苷水解活性相对活力是pNPG的248%,转糖苷活性催化50%底物葡萄糖合成龙胆二糖,达34.25
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