【摘 要】
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构建油包水型乳液体系下假单胞菌脂肪酶固定化,并研究其酶学性质.采用单因素实验,以固定化脂肪酶的水解活力为指标,确定其固定的条件.利用橄榄油乳化法对固定化脂肪酶的催化
【机 构】
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浙江工业大学药学院,浙江杭州,310032
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构建油包水型乳液体系下假单胞菌脂肪酶固定化,并研究其酶学性质.采用单因素实验,以固定化脂肪酶的水解活力为指标,确定其固定的条件.利用橄榄油乳化法对固定化脂肪酶的催化最适温度,热稳定性、最适pH、pH稳定性、操作稳定性,酶促动力学参数等进行测定.获得了固定化脂肪酶条件:脂肪酶浓度为25.0 mg/mL,固定化温度为5℃,时间为2.0h,以大豆油作为乳化体系油相,以80.0 μL TritonX-100作为乳液体系的乳化剂,保护剂三丁酸甘油酯添加量为100.0 μL,交联剂戊二醛25%水溶液的添加量为40.0 μL,并测得在该条件下制备的固定化脂肪酶水解活力为9 220.0 U/g.固定化酶的粒径约10~25 μm,固定化酶经过11次重复使用之后仍然有约78%的相对酶活力.基于乳液体系下制备固定化脂肪酶具有工艺简单、条件温和及操作方便的特点.而且,固定化后的脂肪酶稳定性有明显的提高.
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