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【摘要】目的：探讨蒙药森登-4纳米乳体外急毒及长毒试验结果，为临床安全、合理用药提供依据、参考。方法：经将高、低浓度的蒙药森登-4纳米乳均匀涂抹在大白兔完整皮肤与破损皮肤脱毛区，对大白兔连续进行3个月饲养，观察不同部位皮肤黏膜变化情况，观察药物对皮肤局部变化、血液生化指标、主要脏器的影响。结果：高浓度组与低浓度组皮肤缺损面积均低于对照组（P<0.05）;高浓度组皮肤缺损面积，小于低浓度组（P<0.05）;高浓度组、低浓度组与对照组胆固醇、肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶及谷氨酰转肽酶水平比较无统计学意义（P>0.05）;高濃度组、低浓度组与对照组心、肺、肝、肾及脾主要脏器系数比较无统计学意义（P>0.05）。结论：蒙药森登-4纳米乳用于大白兔中安全性较高，对于血液生化指标、主要脏器的影响较小，是一种较为安全的外用药。
【关键词】蒙药森登-4纳米乳;体外急毒;长毒试验;血液生化指标;主要脏器
【中图分类号】R445【文献标识码】A【文章编号】2107-2306（2019）05-163-02
Experimentalstudyonacutetoxicityandlong-termtoxicityofMongolianmedicineSenden-4nanoemulsion1.InnerMongoliaMedicalUniversity，010010
2.InnerMongoliaInternationalMongolianHospital，010010
【Abstract】Objective：Toinvestigatetheresultsofinvitroacutetoxicityandlong-termtoxicitytestofMongolianmedicineSenden-4nanoemulsion，andprovideevidenceandreferenceforclinicalsafetyandrationaluseofdrugs.METHODS：Thehighand
lowconcentrationsofMongolianmedicineSenden-4nanoemulsionwereevenlyappliedtotheintactskinofthewhiterabbitandthedepilatedareaofthedamagedskin.Therabbitswerekeptfor3months，andthechangesofskinmucosaindifferentpartswereobserved.Localchangesintheskin，bloodbiochemicalindicators，andtheeffectsofmajororgans.Results：Theskindefectareaofthehighconcentrationgroupandthelowconcentrationgroupwerelowerthanthecontrolgroup（P<0.05）;thehighconcentrationgroupandthebloodglucoselevelwerelowerthanthelowconcentration.Groupandcontrolgroup（P<0.05）;therewasnostatisticalcomparisonbetweencholesterol，creatinine，ureanitrogen，alanineaminotransferase，alkalinephosphatase，aspartateaminotransferaseandglutamyltranspeptidaseinhighconcentrationgroupandlowconcentrationgroup.Significance（P>0.05）;therewasnosignificantdifferenceinthemainorgancoefficientsbetweenheart，lung，liver，kidneyandspleeninhighconcentrationgroupandlowconcentrationgroup（P>0.05）.Conclusion：MongolianmedicineSenden-4nanoemulsionissafeforwhiterabbits，andhaslittleeffectonbloodbiochemicalindicatorsandmajororgans.Itisasafertopicalmedicine.
[Keywords]MongolianmedicineSenden-4nanoemulsion;invitroacutetoxicity;longtoxicitytest;bloodbiochemical
indicators;mainorgans
纳米乳液又称为微乳液，是由水、油、表面活性剂与助表面活性剂等自发形成，粒径为1-100nm的热力学稳定、各向同性，透明或半透明的均相分散体系[1]。临床上，将纳米乳分为水包油型纳米乳、油包水型纳米乳及双连续型纳米乳三种。蒙药森登-4出自吉格木德·丹金扎木苏编著的《观者之喜》[2]，是临床上常用的抗风湿经典方，并被中华人民共和国卫生部药品标准。蒙药森登-4主要由文冠木、川楝子、栀子和诃子四味药物组成，具有清热、燥黄水功效，广泛用于关节炎、水肿等病症中[3]。为了进一步的探讨其在用药过程中的副作用及安全用药，进行了体外急毒及长毒试验，报道如下。
1药品：蒙药森登-4纳米乳
低浓度蒙药森登-4纳米乳：0.05g/mL，高浓度0.25g/mL，20.0%乙醇。本药物各味药材均符合法定标准，不含毒性药材。 2仪器与试剂
半自动生化分析仪（型号BT-224），意大利Menarini公司;中生北控生物科技股份有限公司;全自动血液分析仪（型号F820），日本制造;血液分析仪（型号Sysmex），济南希森康医用电子有限公司;低速离心机（型号80-2），上海医疗器械有限公司。
3动物
选择2017年6月-2018年1月参与实验的家兔30只作为对象，雌雄随机，体质量（2.2-2.5）kg，平均（23.00±0.50）kg。动物合格证号：SCXX-2005-0001，所选动物均由医学动物实验中心提供家兔常规饲养，自由摄食、饮水，光照12h，建模前12h禁食。
4方法
4.1試验方法
试验开始前常规对家兔进行喂养，利用肥皂水将家兔背脊柱两侧对称脱毛，脱毛面积控制在150mm2;对于破损的皮肤给予灭菌针尖将去毛消毒皮肤划破，以看见渗血等为宜[4]。
4.2动物分组
将30只家兔采用随机数字法分为高浓度组、低浓度组、对照组，每组10只。根据长期毒试验标准对家兔连续进行
12周干预，每次4mL，将蒙药森登-4纳米乳均匀涂抹在背部脱毛部位，保证药物至少接触6h，给药期间、末次给药后每组家兔以断颈方式处死，抽取心脏血5mL，完成血液分析及血液生化指标检查;观察药物对皮肤局部变化;同时，每只家兔均取心脏、肝脏、肾脏、皮肤及肺部组织2-3块，将获得的组织浸泡在10.0%甲醛溶液中，固定，常规制备切片后制备切片，行HE染色，倒置显微镜下观察不同组织形态[5-6]。
5统计分析
采用SPSS18.0软件处理，计数资料行χ2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（`x±s）表示，P<0.05差异有统计学意义。
6结果
6.1蒙药森登-4纳米乳对皮肤局部变化
高浓度组与低浓度组皮肤缺损面积均低于对照组（P<0.05）;高浓度组皮肤缺损面积，小于低浓度组（P<0.05），见表1。
6.2蒙药森登-4纳米乳对血液生化指标的影响
高浓度组、低浓度组与对照组胆固醇、肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶及谷氨酰转肽酶水平比较无统计学意义（P>0.05），见表2。
与对照组比较，aP<0.05
6.3蒙药森登-4纳米乳主要脏器的影响
高浓度组、低浓度组与对照组心、肺、肝、肾及脾主要脏器系数比较无统计学意义（P>0.05），见表3。
与对照组比较，aP<0.05
3讨论
蒙药森登-4纳米乳属于蒙药验方，主要由文冠木、川楝子、栀子和诃子四味药物组成[7]。方药中，文冠木具有消肿止痛、燥血、干黄水功效，广泛用于风湿性关节炎、麻风病中。川楝子具有行气止痛、燥湿杀虫功效;栀子具有清热利湿、清肝明目、消肿止痛功效;诃子具有敛肺止咳、涩肠止泻功效，诸药共奏，能发挥除浊血、清血热功效。现代药理结果表明[8]：蒙药森登-4纳米乳广泛用于关节炎中，能减轻患者疼痛，改善患者炎症反应，利于患者恢复。但是，临床上对于蒙药森登-4纳米乳在临床中的安全性研究较少。为了提高蒙药森登-4纳米乳临床效果，保证患者合理、科学用药，通过长期毒性实验、体外急毒实验，并将药物用于家兔中，结果表明：高浓度组与低浓度组皮肤缺损面积均低于对照组（P<0.05）;高浓度组皮肤缺损面积，小于低浓度组（P<0.05）;高浓度组、低浓度组与对照组胆固醇、肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶及谷氨酰转肽酶水平比较无统计学意义（P>0.05）;高浓度组、低浓度组与对照组心、肺、肝、肾及脾主要脏器系数比较无统计学意义（P>0.05），说明蒙药森登-4纳米乳用于家兔中具有较高的安全性，并不会对生化指标、机体重要脏器产生影响。但是，对于高浓度蒙药森登-4纳米乳家兔，能引起低血糖，大剂量用药时应引起重视，加强血糖测定，对于异常时及时采取有效的措施进行干预或降低药物剂量，提高用药安全性[9-10]。
综上所述，蒙药森登-4纳米乳用于大白兔中安全性较高，对于血液生化指标、主要脏器的影响较小，是一种较为安全的外用药。
【参考文献】
[1]王冰雨，董玉，盛华，等.蒙药复方森登-4对小鼠的抗炎镇痛作用研究[J].内蒙古医科大学学报，2018，40（2）：80-83.
[2]徐晓艳，杜华，于慧玲，等.蒙药森登-4对胶原诱导性大鼠关节炎VEGF、IL-6表达水平影响的研究[J].内蒙古医科大学学报，2018（5）：474-476，480.
[3]古丽巴哈尔&#;托乎提，艾山&#;艾比布勒，张明君，等.5种蒙药医院制剂微生物限度检查方法建立及探讨[J].食品安全质量检测学报，2018，v.9（10）：248-252.
[4]王冰雨，白埔，董玉，等.蒙药森登-4在正常大鼠与关节炎模型大鼠血清中总黄酮的比较研究[J].内蒙古大学学报（自然科学版），2018，49（05）：47-51.
[5]王冰雨，董玉，盛华，等.蒙药复方森登-4对小鼠的抗炎镇痛作用研究[J].内蒙古医科大学学报，2018，40（2）：80-83.
[6]娜仁高娃.蒙药结合蒙医温针疗法治疗膝关节黄水病临床观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（6）：8-9.
[7]包连胜.蒙西药结合蜡疗治疗关节查干希拉乌森病疗效观察[J].内蒙古民族大学学报（自然汉文版），2017，32（2）：150-152.
[8]锡林高娃.蒙医银针加热疗法结合蒙药治疗中老年人膝骨性关节炎疗效观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（2）：31-32.
[9]诺敏.蒙药药浴结合内服蒙药治疗类风湿性关节炎87例疗效观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（1）：18-19.
[10]诺敏.蒙药结合药浴治疗寻常型银屑病疗效观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（2）：29-30.
【关键词】蒙药森登-4纳米乳;体外急毒;长毒试验;血液生化指标;主要脏器
【中图分类号】R445【文献标识码】A【文章编号】2107-2306（2019）05-163-02
Experimentalstudyonacutetoxicityandlong-termtoxicityofMongolianmedicineSenden-4nanoemulsion1.InnerMongoliaMedicalUniversity，010010
2.InnerMongoliaInternationalMongolianHospital，010010
【Abstract】Objective：Toinvestigatetheresultsofinvitroacutetoxicityandlong-termtoxicitytestofMongolianmedicineSenden-4nanoemulsion，andprovideevidenceandreferenceforclinicalsafetyandrationaluseofdrugs.METHODS：Thehighand
lowconcentrationsofMongolianmedicineSenden-4nanoemulsionwereevenlyappliedtotheintactskinofthewhiterabbitandthedepilatedareaofthedamagedskin.Therabbitswerekeptfor3months，andthechangesofskinmucosaindifferentpartswereobserved.Localchangesintheskin，bloodbiochemicalindicators，andtheeffectsofmajororgans.Results：Theskindefectareaofthehighconcentrationgroupandthelowconcentrationgroupwerelowerthanthecontrolgroup（P<0.05）;thehighconcentrationgroupandthebloodglucoselevelwerelowerthanthelowconcentration.Groupandcontrolgroup（P<0.05）;therewasnostatisticalcomparisonbetweencholesterol，creatinine，ureanitrogen，alanineaminotransferase，alkalinephosphatase，aspartateaminotransferaseandglutamyltranspeptidaseinhighconcentrationgroupandlowconcentrationgroup.Significance（P>0.05）;therewasnosignificantdifferenceinthemainorgancoefficientsbetweenheart，lung，liver，kidneyandspleeninhighconcentrationgroupandlowconcentrationgroup（P>0.05）.Conclusion：MongolianmedicineSenden-4nanoemulsionissafeforwhiterabbits，andhaslittleeffectonbloodbiochemicalindicatorsandmajororgans.Itisasafertopicalmedicine.
[Keywords]MongolianmedicineSenden-4nanoemulsion;invitroacutetoxicity;longtoxicitytest;bloodbiochemical
indicators;mainorgans
纳米乳液又称为微乳液，是由水、油、表面活性剂与助表面活性剂等自发形成，粒径为1-100nm的热力学稳定、各向同性，透明或半透明的均相分散体系[1]。临床上，将纳米乳分为水包油型纳米乳、油包水型纳米乳及双连续型纳米乳三种。蒙药森登-4出自吉格木德·丹金扎木苏编著的《观者之喜》[2]，是临床上常用的抗风湿经典方，并被中华人民共和国卫生部药品标准。蒙药森登-4主要由文冠木、川楝子、栀子和诃子四味药物组成，具有清热、燥黄水功效，广泛用于关节炎、水肿等病症中[3]。为了进一步的探讨其在用药过程中的副作用及安全用药，进行了体外急毒及长毒试验，报道如下。
1药品：蒙药森登-4纳米乳
低浓度蒙药森登-4纳米乳：0.05g/mL，高浓度0.25g/mL，20.0%乙醇。本药物各味药材均符合法定标准，不含毒性药材。 2仪器与试剂
半自动生化分析仪（型号BT-224），意大利Menarini公司;中生北控生物科技股份有限公司;全自动血液分析仪（型号F820），日本制造;血液分析仪（型号Sysmex），济南希森康医用电子有限公司;低速离心机（型号80-2），上海医疗器械有限公司。
3动物
选择2017年6月-2018年1月参与实验的家兔30只作为对象，雌雄随机，体质量（2.2-2.5）kg，平均（23.00±0.50）kg。动物合格证号：SCXX-2005-0001，所选动物均由医学动物实验中心提供家兔常规饲养，自由摄食、饮水，光照12h，建模前12h禁食。
4方法
4.1試验方法
试验开始前常规对家兔进行喂养，利用肥皂水将家兔背脊柱两侧对称脱毛，脱毛面积控制在150mm2;对于破损的皮肤给予灭菌针尖将去毛消毒皮肤划破，以看见渗血等为宜[4]。
4.2动物分组
将30只家兔采用随机数字法分为高浓度组、低浓度组、对照组，每组10只。根据长期毒试验标准对家兔连续进行
12周干预，每次4mL，将蒙药森登-4纳米乳均匀涂抹在背部脱毛部位，保证药物至少接触6h，给药期间、末次给药后每组家兔以断颈方式处死，抽取心脏血5mL，完成血液分析及血液生化指标检查;观察药物对皮肤局部变化;同时，每只家兔均取心脏、肝脏、肾脏、皮肤及肺部组织2-3块，将获得的组织浸泡在10.0%甲醛溶液中，固定，常规制备切片后制备切片，行HE染色，倒置显微镜下观察不同组织形态[5-6]。
5统计分析
采用SPSS18.0软件处理，计数资料行χ2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（`x±s）表示，P<0.05差异有统计学意义。
6结果
6.1蒙药森登-4纳米乳对皮肤局部变化
高浓度组与低浓度组皮肤缺损面积均低于对照组（P<0.05）;高浓度组皮肤缺损面积，小于低浓度组（P<0.05），见表1。
6.2蒙药森登-4纳米乳对血液生化指标的影响
高浓度组、低浓度组与对照组胆固醇、肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶及谷氨酰转肽酶水平比较无统计学意义（P>0.05），见表2。
与对照组比较，aP<0.05
6.3蒙药森登-4纳米乳主要脏器的影响
高浓度组、低浓度组与对照组心、肺、肝、肾及脾主要脏器系数比较无统计学意义（P>0.05），见表3。
与对照组比较，aP<0.05
3讨论
蒙药森登-4纳米乳属于蒙药验方，主要由文冠木、川楝子、栀子和诃子四味药物组成[7]。方药中，文冠木具有消肿止痛、燥血、干黄水功效，广泛用于风湿性关节炎、麻风病中。川楝子具有行气止痛、燥湿杀虫功效;栀子具有清热利湿、清肝明目、消肿止痛功效;诃子具有敛肺止咳、涩肠止泻功效，诸药共奏，能发挥除浊血、清血热功效。现代药理结果表明[8]：蒙药森登-4纳米乳广泛用于关节炎中，能减轻患者疼痛，改善患者炎症反应，利于患者恢复。但是，临床上对于蒙药森登-4纳米乳在临床中的安全性研究较少。为了提高蒙药森登-4纳米乳临床效果，保证患者合理、科学用药，通过长期毒性实验、体外急毒实验，并将药物用于家兔中，结果表明：高浓度组与低浓度组皮肤缺损面积均低于对照组（P<0.05）;高浓度组皮肤缺损面积，小于低浓度组（P<0.05）;高浓度组、低浓度组与对照组胆固醇、肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶及谷氨酰转肽酶水平比较无统计学意义（P>0.05）;高浓度组、低浓度组与对照组心、肺、肝、肾及脾主要脏器系数比较无统计学意义（P>0.05），说明蒙药森登-4纳米乳用于家兔中具有较高的安全性，并不会对生化指标、机体重要脏器产生影响。但是，对于高浓度蒙药森登-4纳米乳家兔，能引起低血糖，大剂量用药时应引起重视，加强血糖测定，对于异常时及时采取有效的措施进行干预或降低药物剂量，提高用药安全性[9-10]。
综上所述，蒙药森登-4纳米乳用于大白兔中安全性较高，对于血液生化指标、主要脏器的影响较小，是一种较为安全的外用药。
【参考文献】
[1]王冰雨，董玉，盛华，等.蒙药复方森登-4对小鼠的抗炎镇痛作用研究[J].内蒙古医科大学学报，2018，40（2）：80-83.
[2]徐晓艳，杜华，于慧玲，等.蒙药森登-4对胶原诱导性大鼠关节炎VEGF、IL-6表达水平影响的研究[J].内蒙古医科大学学报，2018（5）：474-476，480.
[3]古丽巴哈尔&#;托乎提，艾山&#;艾比布勒，张明君，等.5种蒙药医院制剂微生物限度检查方法建立及探讨[J].食品安全质量检测学报，2018，v.9（10）：248-252.
[4]王冰雨，白埔，董玉，等.蒙药森登-4在正常大鼠与关节炎模型大鼠血清中总黄酮的比较研究[J].内蒙古大学学报（自然科学版），2018，49（05）：47-51.
[5]王冰雨，董玉，盛华，等.蒙药复方森登-4对小鼠的抗炎镇痛作用研究[J].内蒙古医科大学学报，2018，40（2）：80-83.
[6]娜仁高娃.蒙药结合蒙医温针疗法治疗膝关节黄水病临床观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（6）：8-9.
[7]包连胜.蒙西药结合蜡疗治疗关节查干希拉乌森病疗效观察[J].内蒙古民族大学学报（自然汉文版），2017，32（2）：150-152.
[8]锡林高娃.蒙医银针加热疗法结合蒙药治疗中老年人膝骨性关节炎疗效观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（2）：31-32.
[9]诺敏.蒙药药浴结合内服蒙药治疗类风湿性关节炎87例疗效观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（1）：18-19.
[10]诺敏.蒙药结合药浴治疗寻常型银屑病疗效观察[J].中国民族医药杂志，2017，23（2）：29-30.