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目的
探讨siRNA干扰组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达对脓毒症血清诱导人脐静脉内皮细胞损伤的影响及其机制。
方法制备脓毒症患者的血清和健康志愿者的血清，体外培养人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)，随机分为空白组(正常培养)、对照组(10 %健康志愿者血清干预)、脓毒症组(10 %脓毒症患者血清干预)、阴性对照组(阴性siRNA转染+ 10 %脓毒症患者血清干预)、TIMP-1 siRNA组(TIMP-1 siRNA转染+ 10 %脓毒症患者血清干预)。四唑盐比色(MTT)法检测内皮细胞的存活率；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及TIMP-1的含量；蛋白免疫印迹(Western blot)法检测内皮细胞MMP-9、TIMP-1及血栓调节蛋白（TM）的表达。
结果与对照比较，脓毒症组内皮细胞存活率于12 h开始下降（P<0.05），48 h降至最低（P<0.01），培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量升高（P<0.01），MMP-9及TIMP-1蛋白表达上调（P<0.01），TM蛋白表达下调（P<0.01）；与脓毒症组比较，TIMP-1 siRNA组内皮细胞存活率下降（P<0.05），培养上清液中MMP-9含量升高（P<0.05），TIMP-1含量降低（P<0.05），MMP-9蛋白表达上调（P<0.01），TIMP-1及TM蛋白表达下调（P<0.01）。
结论TIMP-1在脓毒症血清诱导的内皮细胞损伤中发挥保护作用。