【摘 要】
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目的研究鸦胆子油乳(brucea javanica oil emulsion,BJOE)在体外对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16亚型感染细胞的抑制作用及其可能作用机制。方法选择人宫颈鳞状
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院妇科,温州医科大学附属第一医院医学科学研究所
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目的研究鸦胆子油乳(brucea javanica oil emulsion,BJOE)在体外对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16亚型感染细胞的抑制作用及其可能作用机制。方法选择人宫颈鳞状上皮永生化细胞系(Ect1/E6E7)与人宫颈癌CaSki细胞系作为HPV16亚型感染的宫颈癌前病变与宫颈癌体外实验模型。采用MTT法检测5、10、20及40μg/mL BJOE体外分别作用24、48及72 h对HPV16感染细胞增殖活性的影响;Hoechst 33258细胞核染色荧光显微镜下观察细胞凋亡形态学变化;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;半定量RT-PCR法检测HPV16 E6、E7基因mRNA的表达;免疫细胞化学染色(Elivison二步法)检测HPV16 E6、E7、p53及Rb基因蛋白的表达。结果 (1)5、10、20及40μg/mL BJOE体外分别作用24、48及72 h对HPV16感染细胞的增殖具有明显抑制作用,且表现为浓度与时间的依赖性(P<0.05)。(2)HPV16阳性细胞在BJOE作用后发生了细胞凋亡形态学变化,5、10及20μg/mL BJOE体外作用48 h后细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05)。(3)5、10及20μg/mL BJOE体外作用HPV16阳性细胞48 h后E6与E7基因mRNA的相对表达量逐渐降低(P<0.05)。(4)5、10及20μg/mL BJOE作用后,HPV16 E6、E7及突变型P53蛋白的表达逐渐减弱(P<0.05),而Rb蛋白的表达逐渐增强(P<0.05)。结论 BJOE在体外对HPV16亚型感染细胞具有明显的抑制作用,其作用机制可能与药物下调病毒癌基因E6、E7表达相关。
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