槲皮素抑制TREM-1激活巨噬细胞炎症反应及减轻LPS诱导小鼠急性肺损伤的研究

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目的

观察槲皮素(QUE)对骨髓细胞上表达的触发受体1(TREM-1)激活巨噬细胞炎症反应及脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用,并探讨其可能机制。

方法

体外细胞实验:腹腔注射3%硫醇乙酸钙收集小鼠原代腹腔巨噬细胞,将收集的细胞分为:空白对照组、DMSO溶媒组、TREM-1激动剂(anti-Trem-1)组(10 μg/ml)、QUE组(10 μmol/L)及TREM-1激动剂 QUE组(于加激动剂前,用10 μmol/L QUE预处理细胞30 min)。采用ELISA法检测原代巨噬细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌;为观察QUE对LPS诱导巨噬细胞TREM-1表达的影响,将巨噬细胞分为:对照组、LPS组(100 ng/ml)及LPS QUE组(10 μmol/L QUE预处理后再加入100 ng/ml LPS),收集提取蛋白,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测TREM-1蛋白的表达。动物实验:将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、ALI模型组、QUE组、QUE治疗组,每组20只。ALI模型组气管内注射LPS 5 mg/kg构建小鼠ALI模型,QUE治疗组气管内注射LPS 5 mg/kg构建小鼠ALI模型,之后腹腔注射QUE 15 mg/kg;对照组气管内给予等量生理盐水,之后腹腔注射DMSO;QUE组气管内给予等量生理盐水,之后腹腔注射QUE 15 mg/kg;HE染色观察各组小鼠肺组织病理改变;计数各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BLAF)中炎症细胞及IL-1β、TNF-α和IL-6含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组小鼠肺组织中TREM-1 mRNA和蛋白的表达。

结果

在体外细胞实验中,TREM-1激动剂组原代巨噬细胞上清液中IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌高于DMSO溶解组(均P

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