【摘 要】
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目的 通过对椎间盘纤维环细胞的培养 ,观察细胞的演变 ,为研究椎间盘纤维环细胞的生物学特性、退变机理、组织工程、基因治疗等提供方法和体外模型。方法 采用胰蛋白酶、胶
【基金项目】
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国家自然科学基金 ,3 0 171170 ;上海市“启明星”培养计划 ,0 1QB14 0 3 9;国家博士后基金 ,2 0 0 2 0 3 12 0 9
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目的 通过对椎间盘纤维环细胞的培养 ,观察细胞的演变 ,为研究椎间盘纤维环细胞的生物学特性、退变机理、组织工程、基因治疗等提供方法和体外模型。方法 采用胰蛋白酶、胶原酶分离大鼠椎间盘纤维环细胞 ,选择DMEM(体积分数 2 0 %的小牛血清 )培养基体外培养 ,行HE染色 ,甲苯胺蓝 ,免疫细胞化学染色分析细胞的生物学特性 ,透射电镜观察细胞的超微结构。结果 采用粗品胶原酶能充分消化纤维环组织 ;在含体积分数为 2 0 %小牛血清的DE TA培养液中细胞生长良好 ;原代纤维环细胞多为梭形 ,有伪足伸出 ,甲苯胺蓝染色 ,胞浆染为深蓝色 ;透射电镜下纤维环细胞内多见长条状粗面内质网 ,部分囊池扩张。线粒体较少 ,可见平行于细胞膜方向的微丝。免疫细胞学方法检测表明纤维环细胞有Ⅰ、Ⅱ型胶原表达。结论 本实验为椎间盘纤维环细胞的培养提供了简单、有效的方法 ,为进一步研究椎间盘纤维环细胞生物学功能和调控研究打下了基础。
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