【摘 要】
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目的用毕氏酵母(Pichia pastoris)表达人可溶性Flt3配体 (rhFL),并观察rhFL对恶性造血细胞增殖的作用;探讨地塞米松(DXM)对Flt3受体(Flt3R)表达及rhFL介导的恶性造血细胞增殖
【基金项目】
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国际原子能机构(IAEA)国际合作项目;
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目的用毕氏酵母(Pichia pastoris)表达人可溶性Flt3配体 (rhFL),并观察rhFL对恶性造血细胞增殖的作用;探讨地塞米松(DXM)对Flt3受体(Flt3R)表达及rhFL介导的恶性造血细胞增殖的影响.方法人工合成FL基因片段,经基因重组技术获得重组质粒pPICZα-FL, 电转化毕氏酵母,筛选分泌rhFL 的基因工程菌株.用流式细胞仪测定恶性造血细胞表面Flt3R的表达,用MTT法分析rhFL对恶性造血细胞的增殖作用及DXM的影响.结果经筛选,获得稳定分泌rhFL的基因工程菌株,表达量达30?mg/L.rhFL在10～100?ng/ml时,刺激Raji和HL-60细胞的增殖,但对绝大多数的恶性造血细胞无刺激作用;18株恶性造血细胞株中5株细胞表达Flt3R;对部分病理类型的白血病新鲜标本的研究发现,60%患者的外周血或骨髓细胞表达Flt3R,急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病患者Flt3R的阳性率较高,但仅有部分患者的白血病细胞在体外对FL的刺激有增殖效应.DXM可抑制rhFL对Raji、HL-60细胞及部分新鲜白血病标本的白血病细胞的刺激增殖作用.结论应用毕氏酵母表达具有生物学活性的rhFL,rhFL可刺激Raji、HL-60和部分白血病患者白血病细胞在体外的增殖.DXM通过降低Flt3R的表达,抑制rhFL介导的恶性造血细胞的增殖.DXM有可能用于防止或降低FL对部分恶性造血细胞的刺激作用,使FL的应用更为安全.
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