【摘 要】
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目的 研究ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)基因对结肠癌细胞脂质代谢、增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 体外培养HCT116结肠癌细胞,根据细胞处理方式分为3组:以敲减ACLY基因的HCT116细胞
【机 构】
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武汉大学人民医院普通外科 武汉430060;消化系统疾病湖北省重点实验室 武汉430060
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目的 研究ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)基因对结肠癌细胞脂质代谢、增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 体外培养HCT116结肠癌细胞,根据细胞处理方式分为3组:以敲减ACLY基因的HCT116细胞作为ACLY敲减组,以空载体转染的HCT116细胞作为阴性对照组,以未经处理的HCT116细胞作为空白对照组.以嘌呤霉素筛选出稳定的新细胞系后,采用蛋白质印迹法检测ACLY蛋白的表达情况;采用甘油三酯检测试盒检测细胞甘油三酯水平,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 ACLY敲减组的细胞存活率在120 h时相较于空白对照组和阴性对照组降低,但在24 h和48h时3组的细胞存活率比较差异不大;与阴性对照组和空白对照组比较,ACLY敲减组的凋亡率升高,24 h的迁移率以及胞内甘油三酯水平降低.结论 ACLY基因敲减能够抑制结肠癌细胞的增殖、凋亡和迁移,其机制可能与细胞的脂质合成能力降低有关.
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