【摘 要】
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目的建立高灵敏的可鉴定单个精子细胞、卵子细胞遗传性别的聚合酶链式反应(PCR)方法。方法通过对单个精子细胞、卵子细胞性染色体上的重复序列(Rhox基因、Rbmy基因)的PCR扩增,借助扩增后熔解曲线或琼脂糖凝胶电泳鉴别其遗传性别。结果多重PCR扩增后熔解曲线和电泳结果皆显示该PCR体系可稳定扩增单个精子细胞、卵子细胞DNA并应用于遗传性别鉴定,与传统方法比较,其可扩增单个精子细胞(PCR扩增检出率
【机 构】
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复旦大学生殖与发育研究院 上海市计划生育科学研究所 国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室 200032,复旦大学附属中山医院生殖医学中心,上海 200032,复旦大学生殖与发育研究院 上海市计划生
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目的建立高灵敏的可鉴定单个精子细胞、卵子细胞遗传性别的聚合酶链式反应(PCR)方法。
方法通过对单个精子细胞、卵子细胞性染色体上的重复序列(Rhox基因、Rbmy基因)的PCR扩增,借助扩增后熔解曲线或琼脂糖凝胶电泳鉴别其遗传性别。
结果多重PCR扩增后熔解曲线和电泳结果皆显示该PCR体系可稳定扩增单个精子细胞、卵子细胞DNA并应用于遗传性别鉴定,与传统方法比较,其可扩增单个精子细胞(PCR扩增检出率为75%)、卵子细胞PCR(扩增检出率为100%)中的单倍体DNA。
结论利用基因组性染色体上自身重复序列的存在,可建立高灵敏的、可扩增单倍体DNA的PCR检测方法,继而为后续研究如精子细胞遗传性别比、囊胚遗传性别鉴定等小鼠胚胎性别筛选工作建立基础。
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