黄芪甲苷Ⅳ治疗溃疡性结肠炎模型大鼠的机制研究

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目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(astragalosideⅣ, AsⅣ)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α),结肠组织p-p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)蛋白、p38 MAPK mRNA表达的影响。方法 32只SD大鼠,随机分为AsⅣ组、柳氮磺吡啶(sulfasalazine, SASP)组、模型组、对照组各8只。AsⅣ组、SASP组、模型组饮用质量分数4%葡聚糖硫酸钠溶液7 d制备UC大鼠模型,对照组自由饮用纯水。造模成功后,AsⅣ组给予AsⅣ溶液20 mL/(kg·d)灌胃,SASP组给予SASP溶液25 mL/(kg·d)灌肠,模型组给予生理盐水20 mL/(kg·d)灌肠,均连续7 d;对照组不作任何处理。干预7 d后,评估4组大鼠疾病活动指数评分(disease activity index, DAI);麻醉后取腹主动脉血,采用ELISA法检测血清TNF-α水平;取血后处死大鼠,截取距离肛门2 cm以上结肠组织,HE染色后行病理检查评定组织学损伤评分,采用Western blot法检测p-p38 MAPK蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测p38 MAPK mRNA表达。结果干预7 d后,模型组、AsⅣ组、SASP组DAI评分[(5.50±1.38)、(3.17±1.21)、(2.83±1.67)分]、血清TNF-α水平[(248.17±7.85)、(186.33±11.90)、(208.67±8.38)μg/L]均高于对照组[0,(158.37±6.13)μg/L](P<0.05),模型组高于AsⅣ组、SASP组(P<0.05),AsⅣ组与SASP组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组大鼠结肠黏膜完整,腺体存在,排列规律,可见隐窝结构,黏膜及黏膜下层无炎症细胞浸润;模型组大鼠结肠黏膜不完整,腺体紊乱,排列不规则或消失,黏膜及黏膜下层大量炎症细胞浸润;AsⅣ组与SASP组大鼠结肠黏膜修复,腺体存在,黏膜及黏膜下层炎症细胞明显减少;干预7 d后,模型组、AsⅣ组、SASP组组织学损伤评分[(3.86±0.64)、(2.29±0.88)、(1.86±0.83)分]均高于对照组(0)(P<0.05),模型组高于AsⅣ组、SASP组(P<0.05),AsⅣ组与SASP组比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组p-p38 MAPK蛋白相对表达量(17.29±3.72)高于AsⅣ组(9.52±1.27)、SASP组(10.02±0.22)、对照组(7.25±1.09)(P<0.05),SASP组高于对照组(P<0.05),AsⅣ组、对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组p38 MAPK mRNA相对表达量(2.42±0.09)高于AsⅣ组(1.08±0.08)、SASP组(0.55±0.19)、对照组(1)(P<0.05),AsⅣ组、SASP组、对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对葡萄糖硫酸钠诱导的UC大鼠模型,AsⅣ可通过抑制p38 MAPK信号通路活化,减少TNF-α释放,缓解大鼠肠黏膜损伤,与SASP具有相同的效果。
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