酵母双杂交筛选TEB4相互作用蛋白

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目的酵母双杂交筛选与TEB4(MARCH—VI)有相互作用的蛋白,构建该蛋白基因序列的重组载体。方法以人TEB4为诱饵质粒,利用酵母双杂交技术筛选人淋巴瘤cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得150多个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,发现了一个与TEB4相互作用的蛋白:ATP synthase F0 subunit 6(ATP—C6)。PCK法扩增ATP—C6,亚克隆到质粒pCMV—HA中,获得重组质粒pCMV—HA—ATP—C6,酶切和测序进行鉴定。结
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