秦川牛SREBP1基因重组腺病毒载体的构建与病毒包装

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xxcoldrain

【摘要】

：

克隆秦川牛的SREBP1基因并构建重组腺病毒表达载体,包装扩繁获得高滴度病毒,拟为在细胞水平上开展基因功能的研究奠定基础。本试验以秦川牛脂肪组织为试验材料,提取总RNA并反

【作者】

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付常振昝林森王虹姜碧杰成功王洪宝朱光星李耀坤

【机构】

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西北农林科技大学动物科技学院,国家肉牛改良中心

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2013年8期

【关键词】

：

秦川牛 SREBP1 腺病毒 Qinchuan cattle SREBP1 adenovirus

【基金项目】

：

国家转基因生物新品种培育重大专项（2011ZX08007-002）, 国家肉牛牦牛产业技术体系（CARS-38）, 国家自然科学基金（31272411）, “十二五”国家863计划（2011AA100307-02）, 教育部“长江学者和创新团队发展计划”（IRT0940）, “十二五”国家科技支撑计划（2011BAD28B04-03）

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克隆秦川牛的SREBP1基因并构建重组腺病毒表达载体,包装扩繁获得高滴度病毒,拟为在细胞水平上开展基因功能的研究奠定基础。本试验以秦川牛脂肪组织为试验材料,提取总RNA并反转得到cDNA,以Gen-Bank收录的牛的SREBP1基因mRNA序列设计引物,PCR扩增SREBP1基因与克隆载体pMD19-T Simple连接并测序鉴定。挑选测序正确的SREBP1基因酶切后连接到腺病毒穿梭载体上构建pAdTrack-CMV-SREBP1表达载体,用PmeⅠ限制酶酶切线性化,然后转染到含有骨架载体pAdEasy-

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