【摘 要】
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使用PCR方法从大豆基因组DNA中扩增出大豆油酸脱饱和酶基因fad2-1,连接到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109菌株。测序后,用DNAstar软件进行同源性比对。然后将正确的序列反向
【基金项目】
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国家“863”项目（2006AA100104-15）, 河南省自然科学基础研究项目（2008A208018）
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使用PCR方法从大豆基因组DNA中扩增出大豆油酸脱饱和酶基因fad2-1,连接到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109菌株。测序后,用DNAstar软件进行同源性比对。然后将正确的序列反向克隆到表达载体pBt,并转化农杆菌菌株LBA4404,经双酶切鉴定和PCR扩增检测,获得具有该基因反向序列的农杆菌工程菌,转化烟草无菌苗叶片外植体,经过组织培养和卡那霉素抗性筛选,获得抗性烟草转化植株共75株,PCR扩增出npt-II基因,RT-PCR检测到大豆反义油酸脱饱和酶基因转录产物和GC-MS测定其油酸含量
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