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目的将流式细胞术应用到小鼠局部淋巴结实验(local lymph node assay,LLNA)中,期望建立既可检测化学物致敏性也可同时检测刺激性的方法。方法受试物分为溶剂对照[AOO(丙酮∶橄榄油=4∶1)]、阴性对照(NaCl)、致敏阳性物[己基肉桂醛(HCA)、2,4-二硝基氯苯(DNCB)、2-氨基酚(2-APC)]、刺激阳性物[KOH、十二烷基硫酸钠(SLS)]。采用8~10周龄16~22g的雌性Balb/c小鼠76只,随机分为19个受试物剂量组,每剂量组4只小鼠。每种受试物分别设低、中、高3个剂量组,检测浓度分别为NaCl(100g/L、200g/L、300g/L)、HCA(V/V:3.3%、10.0%、30.0%)、DNCB(2.5g/L、5.0g/L、10.0g/L)、2-APC(12.5g/L、25.0g/L、50.0g/L)、KOH(25g/L、50g/L、100g/L)、SLS(50g/L、100g/L、200g/L)。于试验第1、2、3天将配制后不同浓度受试物稀释液以每耳25μl/d均匀涂布于小鼠双侧耳后。检测小鼠耳缘厚度、耳引流淋巴结重量、B220+(CD45R)亚群淋巴细胞百分数等指标。采用SPSS 11.5分析软件,对数据型指标进行方差分析,并对有差异的个体再行LSD两两比较,并根据刺激指数对受试物致敏性大小进行分级。结果与溶剂对照比较中高剂量的SLS和KOH均可引起小鼠耳缘厚度增加(P<0.01)。可判定SLS、KOH对皮肤有刺激性。DNCB、HCA各剂量组和2-APC高剂量组刺激指数均大于3,可以判断该3种化学物为皮肤致敏物。根据SI计算EC3的值,对致敏物进行分类:DNCB(0.196)为强致敏物,HCA(1.556)和2-APC(3.156)为中等致敏物。结论应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测B220+(CD45R)亚群淋巴细胞百分数作为致敏性观察指标的改良小鼠淋巴结实验,结合耳缘厚度检测可实现同时评价化学物的皮肤致敏性和刺激性。