【摘 要】
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目的:探讨过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUC-MSCs)移植后对糖尿病肾病的治疗作用.方法:构建CXCR4的慢病毒表达载体,并建立
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院老年科 上海200080
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目的:探讨过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUC-MSCs)移植后对糖尿病肾病的治疗作用.方法:构建CXCR4的慢病毒表达载体,并建立过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(CXCR4-MSCs).采用8周龄健康雌性SD大鼠75只,其中15只为正常对照组,60只为实验组.实验组糖尿病成模后一个月,将糖尿病实验大鼠60只随机分为4组:①移植CXCR4-MSCs组(CXCR4基因转染MSCs组),即CXCR4组;②移植null-MSCs组(空质粒未转染CXCR4基因的MSCs组),即null-MSCs;③移植MSCs组(MSCs组);④PBS组(未移植任何的MSCs,单纯PBS注射,PBS组).将CX-CR4-MSCs、null-MSCs及MSCs消化离心,取含lx 106个细胞悬液经尾静脉分别注入CXCR4-MSCs组、null-MSCs组及MSCs组大鼠体内,PBS组注射lmLPBS.干细胞治疗8周后,处死五组大鼠.各组大鼠处死前放代谢笼留取24 h尿,计算尿量,保存送检.处死前尾静脉采血检测血糖、称体重并记录.观察血糖、肾脏肥大指数、肾重、体重、24小时尿蛋白排泄量,并观察肾脏组织病理学改变.结果:60只SD雌性大鼠糖尿病模型成功率达100％,至实验8周糖尿病大鼠总共死亡14只,存活率达76.67％.实验开始后的8周,所有CXCR4组、Null-MSCs组、MSCs组、PBS组大鼠与正常组比较,体重均明显减轻(P＜0.01),血糖明显升高(P＜0.01).MSCs治疗后8周,除正常组外,其余各组大鼠血糖、肾重、肾重/体重比、24小时尿蛋白均显著增高,体重显著降低(P＜0.05);与PBS组相比,CXCR4组、null-MSCs组,MSCs组大鼠的肾重、肾重/体重比、24小时尿蛋白均明显降低(P＜0.05),体重无明显增加,血糖无明显降低(P＞0.05).CXCR4组大鼠的肾重、肾重/体重比、24小时尿蛋白较除正常组外的各组均明显降低(P＜0.05).糖尿病成模后,给予大鼠尾静脉注射干细胞悬液或等量培养液,注射后8周,除正常组外,其余各组PAS染色可见大鼠肾小球肥大,肾小球基底膜增厚、系膜增生、系膜基质增多,部分肾小球出现明显硬化,符合糖尿病肾病中期病理表现.CXCR4组大鼠肾小球系膜基质增生较其余各组大鼠减少(P＜0.05).结论:转染CXCR4的MSCs可改善糖尿病肾病.
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