【摘 要】
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采用表位合成多肽免疫获得编码人源抗体的基因材料,抗体轻重链可变区基因通过剪接重叠延伸(SOE)技术进行组装后,亚克隆入噬菌体粒中构建免疫文库.以重组制备的A型肉毒毒素保
【机 构】
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军事医学科学院,微生物流行病研究所,北京,100071
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采用表位合成多肽免疫获得编码人源抗体的基因材料,抗体轻重链可变区基因通过剪接重叠延伸(SOE)技术进行组装后,亚克隆入噬菌体粒中构建免疫文库.以重组制备的A型肉毒毒素保护性抗原为配体筛选结合子,ELISA鉴定,获得具有较高抗原结合力的噬菌体克隆,进行基因测序和家族定位分析.结果显示,表位合成多肽免疫,成功构建了库容大于108的重组抗体文库.体外3轮免疫淘筛,筛选到人源A型肉毒抗毒素克隆,基因结构分析表明,其中ScFvB17全长750 bp,可编码250个氨基酸残基:VH属于VH4家族,369 bp,编码123个氨基酸残基;VK属于K链Ⅱ家族,336 bp,编码112个氨基酸残基.基因的同源分析表明,这是一株特异的单链抗体新基因.
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