【摘 要】
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目的:观察原代心肌细胞模拟缺血/再灌注(I/R)对缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响以及HIF-1α在辛伐他汀心肌细胞保护中的作用.方法:原代培养心肌细胞,采用Western blot检测HI
【机 构】
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新疆兵团第六师奇台医院心内科,新疆奇台831800;新疆军区西安第一干休所卫生所,陕西西安710061;第四军医大学唐都医院心内科,陕西西安710038
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目的:观察原代心肌细胞模拟缺血/再灌注(I/R)对缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响以及HIF-1α在辛伐他汀心肌细胞保护中的作用.方法:原代培养心肌细胞,采用Western blot检测HIF-1α在心肌细胞中的表达水平,采用HEPES缓冲液在低氧(10 ml/L)条件下培养心肌细胞2h(模拟缺血组,ISC组),然后以含有100 ml/L新生牛血清的DMEM培养液在常规细胞培养箱中继续培养细胞6h(缺血/再灌注组,I/R组),辛伐他汀预处理(SIM)组是用2 μmol/L辛伐他汀预处理心肌细胞后再进行I/R处理.以这种方法模拟细胞在缺血时缺乏血清、糖和氧供的培养条件,再灌注时恢复血清、糖及正常供氧供的条件.接着,运用表达HIF-1α的腺病毒载体在原代心肌细胞中的过表达HIF-1α,采用Western blot检测PARP降解程度方法检测对照腺病毒(AdC)组、对照腺病毒感染细胞进行I/R处理(AdCIR)组、对照腺病毒感染细胞采用2μmol/L辛伐他汀预处理后进行I/R处理(AdCIRS)组和Ad-HIF-1α感染细胞后采用2μmol/L辛伐他汀预处理后进行I/R处理(AdHIRS)组心肌细胞的凋亡程度.结果:模拟I/R诱导HIF-1α的表达,原代心肌细胞模拟缺血2 h HIF-1α表达是对照组的(3.4±0.8)倍(P＜0.05);而模拟缺血2h/再灌注6h组HIF-1α表达是对照组的(8.9±1.5)倍(P＜0.05).辛伐他汀抑制I/R诱导的HIF-1α表达增高.采用表达HIF-1α的腺病毒过表达HIF-1α抵消了辛伐他汀抑制PARP蛋白降解产物的作用.结论:证明I/R可以诱导HIF-1α表达升高,而辛伐他汀可以显著抑制HIF-1α表达的升高;辛伐他汀对HIF-1α表达的抑制是其心肌保护作用的机制之一.
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