【摘 要】
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目的研究肺腺癌细胞在靶向治疗药物吉非替尼(Gefitinib)作用下缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)与自噬(autophagy)的表达关系。方法将人肺腺癌A549细
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目的研究肺腺癌细胞在靶向治疗药物吉非替尼(Gefitinib)作用下缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)与自噬(autophagy)的表达关系。方法将人肺腺癌A549细胞株分为4组:常氧组(21%O2,C组)、吉非替尼组(50μg/ml,G组)、缺氧组(1%O2,H组)、吉非替尼+缺氧组(50μg/ml吉非替尼+1%O2,G+H组),分别培养24 h,Western blot法检测HIF-1α蛋白及微管相关蛋白轻链-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,MAPLC3-Ⅱ)蛋白表达水平,透射电子显微镜观察自噬小体数量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 HIF-1α蛋白检测显示:C组和G组基本无表达(分别为0.24±0.05和0.11±0.03),H组(1.34±0.08)较C组显著升高,G+H组(0.78±0.04)表达较H组下降。MAPLC3-Ⅱ蛋白检测显示:C组为(0.85±0.06),G组和H组(分别为1.32±0.03和1.62±0.05)均较C组增高,G+H组(1.97±0.04)较C组明显增高。G组、H组和G+H组的自噬小体数量均较C组明显增多。细胞凋亡率检测显示:C组为(7.20±1.80)%,G+H组[(34.4±3.95)%]较C组显著增加,且较G组和H组[分别为:(20.03±1.12)%和(16.77±1.15)%]均明显增高。以上所有比较,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论吉非替尼能诱导缺氧的A549细胞中自噬上调及抑制缺氧诱导的HIF-1α表达,HIF-1α及自噬表达与吉非替尼的肺癌靶向治疗机制之间可能存在相关性。
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