【摘 要】
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目的：利用分子克隆技术构建重组表达载体pQE/Dnajb13，在大肠埃希菌中高效表达、鉴定并纯化。方法应用RT-PCR技术，以小鼠睾丸cDNA文库为模板扩增Dnajb13基因全长开放阅读框，将其连
【基金项目】
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国家自然科学基金（81070531）
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目的：利用分子克隆技术构建重组表达载体pQE/Dnajb13，在大肠埃希菌中高效表达、鉴定并纯化。方法应用RT-PCR技术，以小鼠睾丸cDNA文库为模板扩增Dnajb13基因全长开放阅读框，将其连接到pQE载体后测序鉴定；将重组质粒转入宿主菌E.coli M15，经IPTG诱导表达His/Dnajb13融合蛋白，Ni2＋亲和层析纯化融合蛋白，采用SDS-PAGE和Western blotting对融合蛋白进行分析和鉴定。结果成功构建了pQE/Dnajb13重组质粒，测序结果与预期一致；转化重组质粒的E.c
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