【摘 要】
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目的:应用酵母双杂交技术筛选和鉴定连接蛋白26(connexin 26, Cx26)的相互作用蛋白质.方法:以正常人DNA为模板,PCR扩增Cx26(GJB2)全长编码区作为诱饵,基因重组法定向克隆到第
【机 构】
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中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科和听力研究室,中南大学医学遗传学国家重点实验室,中南大学湘雅二医院消化内科
【基金项目】
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国家自然科学基金，国家自然科学基金
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目的:应用酵母双杂交技术筛选和鉴定连接蛋白26(connexin 26, Cx26)的相互作用蛋白质.方法:以正常人DNA为模板,PCR扩增Cx26(GJB2)全长编码区作为诱饵,基因重组法定向克隆到第3代MatchMaker Gal4双杂交系统的pGBKT7质粒,用构建的pGBKT7-Cx26质粒筛选人胎脑cDNA文库,获得的阳性克隆的插入子为Cx26的相互作用蛋白质(猎物),将Cx26和筛选到的相互作用蛋白再一对一回复进行酵母双杂交实验,去除假阳性.对阳性克隆插入子的DNA序列进行测序,在GenBan
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