【摘 要】
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目的:观察促酰化蛋白(ASP)诱导3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,转录因子PPARγ、C/EBPδ、C/EBPα mRNA表达的强度及时序性.方法:以3T3-L1前脂肪细胞为实验对象,用ASP代替经典激
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科心血管研究室,加拿大麦吉尔大学医学中心皇家维多利亚医院心血管脂代谢研究室
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目的:观察促酰化蛋白(ASP)诱导3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,转录因子PPARγ、C/EBPδ、C/EBPα mRNA表达的强度及时序性.方法:以3T3-L1前脂肪细胞为实验对象,用ASP代替经典激素鸡尾酒诱导刺激中的胰岛素,即促酰化蛋白、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤和地塞米松(ASP+IBMX+DEX)诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,分别在诱导分化1d、2d、4d、6d、8d收获细胞,采用RT-PCR法检测ASP诱导3T3-L1前脂肪细胞分化过程中转录因子PPARγ、C/EBPδ、C-EBPαmRNA表达的情况.结果:PPARγ mRNA在诱导分化1 d时有低水平表达,在诱导分化过程中表达逐步升高,在终末分化阶段仍保持高水平表达.C/EBPδ mRNA在诱导分化1 d时有中等水平表达,在诱导分化2 d时表达水平最高,诱导分化4 d时表达明显减少,在诱导分化6 d和8 d,检测不到C/EBPδ mRNA的表达.C/EBPα mRNA在诱导分化1 d仅有低水平表达,在诱导分化过程中表达逐步升高,在终末分化阶段仍保持高水平表达.IBMX+DEX诱导前脂肪细胞分化过程中,PPARγ、C/EBPδ和C/EBPα mRNA分化早期也有一定升高,但明显低于ASP诱导的转录因子的表达.结论:ASP对转录因子C/EBPδ、C/EBPα和PPARγ表达的时序性影响,可能是ASP诱导前脂肪细胞分化的重要分子机制之一.
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