pYr-Lvsh-CAPNS1-shRNA真核表达干扰载体构建与鉴定

来源 :贵州医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nvli2010

【摘要】

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目的利用RNA干扰技术构建pYr-Lvsh-CAPNS1-shRNA载体,并在Hela细胞中鉴定。方法针对目的基因人的CAPNS1基因(NM_001749),设计shRNA序列,以pYr-Lvsh为载体,构建pYr-Lvsh-CAPNS

【作者】

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朱家佳龙鼎新

【机构】

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南华大学公共卫生学院

【出处】

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贵州医药

【发表日期】

：

2019年5期

【关键词】

：

CAPNS1 RNA干扰 pYr-Lvsh 载体构建 CAPNS1 RNA interference pYr-Lvsh Vector construction

【基金项目】

：

国家自然科学基金(81673227,81172712),湖南省研究生创新科研项目(CX2018B628).

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目的利用RNA干扰技术构建pYr-Lvsh-CAPNS1-shRNA载体,并在Hela细胞中鉴定。方法针对目的基因人的CAPNS1基因(NM_001749),设计shRNA序列,以pYr-Lvsh为载体,构建pYr-Lvsh-CAPNS1-shRNA载体;干扰载体转染Hela细胞,利用荧光定量PCR检测CAPNS1mRNA表达情况;荧光分光光度检测calpain活性;Western-blot检测相关蛋白含量。结果结果发现,载体酶切及测序结果显示pYr-Lvsh-CAPNS1-shRNA载体构建成功;qPC

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