【摘 要】
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目的:探讨臭牡丹总黄酮对血小板源性生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移及表型转换的影响及其机制.方法:采用组织块贴壁法培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为正常对照组、模型组及臭牡丹总黄酮低、中、高浓度组.CCK-8法检测VSMCs增殖活性;划痕实验检测VSMCs迁移能力;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测VSMCs表型标志物mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测VSMCs表型标志物、增殖、迁移及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白
【机 构】
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金华市中心医院心血管内科,浙江 金华 321000;石河子大学医学院第一附属医院中医二科,新疆石河子832008
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目的:探讨臭牡丹总黄酮对血小板源性生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移及表型转换的影响及其机制.方法:采用组织块贴壁法培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为正常对照组、模型组及臭牡丹总黄酮低、中、高浓度组.CCK-8法检测VSMCs增殖活性;划痕实验检测VSMCs迁移能力;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测VSMCs表型标志物mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测VSMCs表型标志物、增殖、迁移及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型组VSMCs增殖活性、迁移率及增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、骨桥蛋白(OPN)、β-catenin蛋白及OPN mRNA表达显著升高,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22 alpha(SM22α)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(pGSK-3β)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白表达及 α-SMA、SM22αmRNA表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,臭牡丹总黄酮各浓度组VSMCs增殖活性、迁移率及PCNA、cyclin D1、MMP-2、MMP-9、OPN、β-catenin蛋白表达及OPN mRNA表达显著降低,α-SMA、SM22α、pGSK-3β/GSK-3β蛋白表达及α-SMA、SM22αmRNA表达显著升高(P<0.05),其作用呈浓度依赖性.结论:臭牡丹总黄酮可抑制PDGF诱导下VSMCs增殖、迁移及表型转换,其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路密切相关.
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