miR-155调控THP-1巨噬细胞炎症的作用机制

来源 :医学研究生学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:colossus198201
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目的 miR-155在巨噬细胞炎症反应中被诱导,但其调控巨噬细胞炎症的作用尚未完全探索,文章旨在探讨miR-155在脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞炎症反应中的调控作用及其机制。方法 使用LPS诱导THP-1来源的巨噬细胞为体外炎症细胞模型。细胞进行分组:(1)miRNA转染:空白组、LPS组、miR-155 mimics+LPS组、mimics NC+LPS组;(2)siRNA转染:对照组、LPS组、siRNA-SOCS1+LPS组、siRNA-NC+LPS组。qRT-PCR检测miR-155在THP-1巨噬细胞炎症中的表达;转染miR-155 mimics/mimics NC后用qRT-PCR和ELISA检测miR-155对巨噬细胞炎症因子TNF-α和IL-8转录/蛋白的影响;Targetscan数据库预测miR-155作用的靶基因,并用qRT-PCR验证miR-155和SOCS1之间的靶向关系;siRNA沉默靶基因SOCS1,qRT-PCR和Western Blot检测沉默效率;qRT-PCR检测沉默靶基因SOCS1对巨噬细胞炎症因子TNF-α和IL-8转录的影响;Western blot验证miR-155通过靶基因SOCS1调控THP-1巨噬细胞炎症反应。结果 qRT-PCR结果显示,与空白组相比,THP-1巨噬细胞在LPS诱导后miR-155表达明显上调(P<0.05)。miR-155 mimics+LPS组较LPS组TNF-α、IL-8升高(P<0.05)。转染miR-155 mimics后,THP-1巨噬细胞中miR-155 mRNA明显升高(P<0.05),而SOCS1 mRNA显著下调(P<0.05)。Western Blot结果显示,与LPS组相比,miR-155 mimics+LPS组中SOCS1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 miR-155可上调THP-1巨噬细胞炎症中TNF-α、IL-8的表达,其调控机制可能是通过靶向降低SOCS1蛋白的表达,促进LPS所致的THP-1巨噬细胞炎症反应及免疫应答。
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