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菌毛黏附素是产肠毒素大肠埃希氏菌(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC)感染仔猪并导致其腹泻的重要致病因子,研究表明口服免疫F4菌毛或菌毛黏附素主要蛋白亚基FaeG可诱导仔猪产生特异性免疫应答.安全级乳酸乳球菌(L lactis)被认为是表达外源抗原的理想候选菌株,本实验室采用L.lactis构建了表达FaeG的重组菌L.lactis NZ9000(pNZ8148-faeG),已证明皮下接种重组菌可诱导小鼠产生特异性系统免疫反应.仔猪是F4 ETEC最终宿主和易感动物,故在小鼠免疫试验取得成功的基础上,进一步研究肌肉注射重组L.lactis是否能诱导仔猪产生特异性免疫应答,为重组L.lactis表达外源抗原应用于仔猪试验研究提供参考资料.选择体重相近、血清抗F4菌毛抗体水平与新生仔猪相近的6周龄杜×长×大哺乳仔猪21头,随机分成3组,即对照组Ⅰ (PBS)、对照组Ⅱ[L.lactis NZ9000(pNZ8148)]、试验组Ⅲ[重组菌L lactis NZ9000(pNZ8148-faeG)免疫],上述各供试物质与弗氏完全佐剂/弗氏不完全佐剂等体积混合,于试验第0天和第15天进行肌肉注射接种.于0dppi、7dppi、14dppi、21dppi、28dppi、35dppi、42dppi(初次免疫后天数)颈静脉采血,分离血清,以1∶20、1∶60和1∶160稀释,间接ELISA法检测血清中抗F4菌毛特异性IgA、IgM和IgG.在50 dppi,每组随机取3只仔猪屠宰,取十二指肠、空肠和回肠制备肠黏膜浸提物,1∶20稀释,间接ELISA法检测肠道黏膜组织中特异性IgA和IgM.结果显示:肌内注射免疫重组L.lactis可诱导仔猪产生特异性血清IgG、IgA和IgM.在21dppi、28dppi、35dppi和42dppi,血清特异性IgG抗体水极显著高于载体对照组(P<0.01),在21dppi和28dppi,血清中特异性IgA抗体水平显著高于载体对照组(P<0.05),到35dppi时,血清特异性IgM抗体水平显著高于载体对照组(P<0.05).重组L.lactis免疫组仔猪空肠和回肠组织黏膜中特异性IgA抗体水平均高于载体对照组,但差异不显著(P>0.05);空肠组织黏膜中特异性IgM抗体水平高于载体对照组,但差异不显著(P>0.05).结果提示,肌肉注射免疫L.lactis NZ9000(pNZ8148-faeG)能够诱导仔猪产生特异性免疫反应,并以系统免疫反应为主.本研究为通过注射途径预防仔猪ETEC感染,以及重组L.lactis疫苗的研究提供了参考资料.