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目的:探讨精浆游离miR-122-3p和miR-141-5p的稳定性及其对特发性弱精症的诊断价值.
方法:分析不同的室温孵育时间、反复冻融次数、4℃放置时间下精浆游离miR-122-3p和miR-141-5p的稳定性.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)来检测试验组和对照组精浆miR-122-3p和miR-141-5p的含量,以U6 snRNA作为内参,相对定量采用2-△△Ct法.将特发性弱精症组按精子前向运动(PR)百分比分为a组(0-20％)和b组(21-32％),比较两组精浆miR-122-3p和miR-141-5p的含量差异.
结果:在不同的室温孵育时间、4℃放置时间下,精浆miR-122-3p和miR-141-5p含量无明显变化.反复冻融条件下,精浆miR-122-3p和miR-141-5p随着冻融次数的增加而减少.RT-PCR结果表明,特发性弱精症组的精浆游离miR-122-3p含量低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),miR-141-5p含量高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).精浆游离miR-122-3p和miR-141-5p含量在特发性弱精症a组和b组之间,均有显著性差异(P＜0.05).ROC曲线结果显示,miR-122-3p曲线下面积(AUC)为0.88,当以1.02为最佳截断值时,敏感度为83％,特异度为84％.miR-141-5p的AUC为0.88,当以2.95为最佳截断值时,敏感度为84％,特异度为70％.
结论:精浆中游离miR-122-3p和miR-141-5p可稳定存在,其在特发性弱精症中的差异表达对特发性弱精症的诊断有一定的应用价值.