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目的通过比较研究Real Time Cell Analyze （RTCA）实时监测方法及Alamar Blue法测定纳米氧化铜体外作用于人胚肺成纤维细胞MRC-5及人正常肺上皮细胞BEAS-2B的毒性作用,探讨RTCA实时监测技术用于测定纳米材料体外细胞毒性的可行性。材料和方法分别将MRC-5及BEAS-2B细胞接种于RTCA配套16孔板中及普通96孔板中,96孔板中细胞用于Alamar Blue法测定细胞毒性。接种27h后,分别用剂量为0.75mg/ml、0.38mg/ml、0.19mg/ml、0.094mg/ml、0.047mg/ml的纳米氧化铜混悬液进行染毒。选择12 h、24 h、36 h、48 h、60 h时间点计算两种方法测得的IC50值。采用SPSS16.0分析软件,利用配对T检验,对RTCA实时监测法及Alamar Blue法所得相同时间点的IC50值进行统计分析,判断其相关性及是否存在差异。结果MRC-5细胞用RTCA法测定染毒后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h的IC50值分别为391μg/ml、249μg/ml、185μg/ml、165μg/ml、147μg/ml;Alamar Blue法所得相同时间点的IC50值分别为507μg/ml、206μg/ml、172μg/ml、154μg/ml、95.2μg/ml。两种方法所测得IC50值进行统计分析,其差值经正态性检验W=0.778,p=0.053（>0.05）,差值服从正态分布。经配对样本相关性分析,两组IC50值相关系数为0.979,p=0.004（<0.05）,具有相关性。配对T检验结果,t=0.19,自由度df=4,双侧检验p=0.986（>0.05）,无明显差异。BEAS-2B细胞用RTCA法测定染毒后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h的IC50值分别为131μg/ml、83.78μg/ml、65.37μg/ml、53.98μg/ml、51.23μg/ml;Alamar Blue法所得相同时间点的IC50值分别为148μg/ml、104μg/ml、77.3μg/ml、42.5μg/ml、39.2μg/ml。两种方法所测得IC50值进行统计分析,差值经正态性检验W=0.813,p=0.104（>0.05）,差值服从正态分布。经配对样本相关性分析,两组IC50值相关系数为0.971,p=0.006（<0.05）,具有相关性。经对T检验结果,t=0.731,自由度df=4,双侧检验p=0.505（>0.05）,无明显差异。结论RTCA实时监测法与Alamar Blue法在相同时间点测定纳米氧化铜体外细胞毒性得IC50值无明显差异,说明RTCA实时监测法测定体外细胞毒性结果可靠,适用于纳米材料的体外毒性研究。