【摘 要】
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目的:应用蛋白质组学技术与方法,从蛋白质组学整体的角度,对比分析不同强度跑台运动与30km跑后尿液蛋白质组的差异性表达,初步筛选对运动应激具有重要意义的目标蛋白质,为运动训练监控寻找一种无创、系统化的评价方法提供实验借鉴和理论依据.方法:不同强度跑台运动与30km跑的研究对象分别为广州体育学院男生8名和参加2011年全国绿道长跑挑战赛的男子10名,前者分别以55%、75%、85%、95% VO2m
【机 构】
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广州体育学院运动生化省重点实验室,广东广州510500
【出 处】
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2012年中国运动生理生化学术会议
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目的:应用蛋白质组学技术与方法,从蛋白质组学整体的角度,对比分析不同强度跑台运动与30km跑后尿液蛋白质组的差异性表达,初步筛选对运动应激具有重要意义的目标蛋白质,为运动训练监控寻找一种无创、系统化的评价方法提供实验借鉴和理论依据.方法:不同强度跑台运动与30km跑的研究对象分别为广州体育学院男生8名和参加2011年全国绿道长跑挑战赛的男子10名,前者分别以55%、75%、85%、95% VO2max强度进行跑台运动,95% VO2 max强度:5×8组,跑5min,组间休息5min,共跑8组;85% VO2max强度:8m×5组,跑8min,组间休息5min,共跑5组;75% VO2max强度:10m×4组,跑10min,组间休息5min,共跑4组;55% V02 max强度:20m×2组,跑20min,组间休息5min,共跑2组;后者依举办方规定路线绕肇庆星湖绿道进行30km跑,运动全程佩戴SUUNTO心率表并记录各自运动成绩.分别留取运动前(晨)、后(15min)尿液,计算尿液容积及集尿时间,每100ml迅速加入1ml的蛋白酶抑制剂PMSF(1mmol/L),-80℃保存,待测.应用双向凝胶电泳技术确立各自运动前后尿液蛋白质组的差异性表达图谱,选取运动前后差异性表达量上调≥5倍和新增的蛋白点,用基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱仪进行质谱鉴定.结果:1)不同强度跑台运动共获得差异性表达量≥2的蛋白点275个;运动后上调≥2、5及新增的蛋白点分别为83、46、61个;运动后下调≥2、5及消失的蛋白点分别为37、28、20个;目标蛋白经质谱分析,共鉴定出104个蛋白点,包含了64种蛋白.2)30km跑前、后尿液2-DE图谱平均检测到蛋白质点1011±243和1737±15个,共获得差异性表达蛋白点110个,上调与下调各55个.运动后上调≥5的蛋白质点10个,新增点23个;运动后下调≥5的蛋白质点18个,消失点6个.目标蛋白经质谱分析,共鉴定出6个蛋白点,这些蛋白与机体能量代谢方式的转变、物质的转运、应激保护有关.3)不同强度跑台运动与30km跑后共同表达的差异性蛋白为:锌-α2-糖蛋白、维生素D结合蛋白、本斯-琼斯蛋白等蛋白质.结论:不同强度跑台运动与30km跑后尿液蛋白质图谱均发生了明显的差异性变化,两者共获差异性表达蛋白点为锌-α2-糖蛋白、维生素D结合蛋白和本斯-琼斯蛋白,这为进一步深入研究运动性蛋白尿及其在运动训练监控中具有运动应激特点的目标蛋白质提供了新的思路与方向.
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