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目的抗菌药物和重金属盐在饲料中的普遍添加,无疑会导致其向环境中源源不断地释放,从而加剧相关抗性基因在环境中的传播和扩散。本试验开展猪源大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌的铜抗性发生率及抗铜基因、耐药基因携带检测分析,旨在了解猪源常见细菌铜抗性分布并初步探索抗菌药物耐药基因与重金属抗性基因之间的关系。方法与结果采用CLSI微量肉汤稀释法,对猪源大肠杆菌130株、沙门氏菌32株和葡萄球菌13株进行药敏试验,筛选出抗铜菌株。结果显示:硫酸铜对上述各菌株的MIC为8-10 mM。其中当MIC为8mM时,分离自仔猪、生长肥育猪和出栏猪的大肠杆菌铜抗性分别为9.23%、9.23%和15-38%;MIC为9mM时,分离自仔猪、生长肥育猪和出栏猪的大肠杆菌铜抗性分别为32.3 1%、10.77%和6.15%:MIC为10mM时,分离自仔猪、生长肥育猪和出栏猪的大肠杆菌铜抗性分别为12.31%、3.08%和1.54%。当MIC为8 mM、9mM、10mM所对应的沙门氏菌铜抗性分别为18.75%、68.75%、12.5%。MIC值为8 mM、9mM、10raM所对应的葡萄球菌铜抗性分别为45.45%、45.45%、9.09%;进一步采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术检测其抗铜基因(pcoABCDE)和耐药基因(tetA、tetB、strA、strB、sul2),结果表明:大肠杆菌临床分离株pcoA、pcoB、pcoC、pcoD和pcoE抗铜基因携带率占总检测菌株数的31.5%(41/130);沙门氏菌临床分离株pcoA、pcoB、pcoC、pcoD和pcoE抗铜基因携带率占总检测菌株数的59.4%(19/32);而11株临床分离的葡萄球菌均未检测到抗铜基因。另外,同时具有pcoA、pcoB、pcoC、pcoD和pcoE抗铜基因的41株抗铜大肠杆菌中,携带耐药基因tetA、tetB、strA、strB、sul2均较高,分别为60.98%、36.59%、90.24%、95.12%、90.24%;而同时具有pcoA、pcoB、pcoC、pcoD和pcoE抗铜基因的19株沙门氏菌中,携带耐药基因tetA、tetB、strA、strB、sul2差异则较大,分别为73.68%、5.26%、100.0%、100.0%、15.79%。结论三种常见猪源病原菌均存在不同程度的铜抗性。pco抗铜基因簇较普遍地存在于猪源大肠杆菌和沙门氏菌中,且这5种抗铜基因均同时出现在某一株大肠杆菌或沙门氏菌中,表现出这五种抗铜基因的协同性。tetA、tetB、strA、strB、sul2这5种耐药基因在铜抗性菌株中的存在,说明饲料中添加铜盐导致铜抗性基因产生的同时也协同选择了某些耐药基因。其中,氨基糖苷类抗菌药物和磺胺类抗菌药物与抗铜大肠杆菌协同选择密切程度很高(>90%),四环素类抗菌药物次之;氨基糖苷类抗菌药物与抗铜沙门氏菌协同选择密切程度最高(100%),四环素类抗菌药物其次,磺胺类抗菌药物最低(<20%)。