【摘 要】
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由多堆柄锈菌(Puccinia polysora Underw.)引起的玉米南方锈病是一种世界范围内的毁灭性真菌病害.快速及时诊断与定量检测潜伏状态下的玉米多堆柄锈菌,对玉米南方锈病流行侵染的早期预测预报,以及制定合理的防治措施具有重要意义.本研究根据多堆柄锈菌(Puccinia polysora)的ITS2序列的418～619 bp片段和玉米Actin 2基因序列的1 853～2 467bp片段
【机 构】
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中国农业大学植物病理系,北京100193 美国加州大学Kearney农业研究中心,Parlier
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由多堆柄锈菌(Puccinia polysora Underw.)引起的玉米南方锈病是一种世界范围内的毁灭性真菌病害.快速及时诊断与定量检测潜伏状态下的玉米多堆柄锈菌,对玉米南方锈病流行侵染的早期预测预报,以及制定合理的防治措施具有重要意义.本研究根据多堆柄锈菌(Puccinia polysora)的ITS2序列的418～619 bp片段和玉米Actin 2基因序列的1 853～2 467bp片段,分别设计特异性引物和TaqMan探针：PpoF/PpoR和PpoP(多堆柄锈菌)、ZmF/ZmR和ZmP(玉米).经Real-time PCR扩增对2对引物的特异性和灵敏性进行了测定.结果表明,2对引物和探针对各自靶标片段均具有良好的特异性,且最低可检测出的多堆柄锈菌DNA浓度和玉米DNA浓度分别为1pg/μl和10pg/μl.同时通过梯度稀释模板DNA建立了多堆柄锈菌和玉米的标准曲线,能够准确定量测定潜伏状态下的多堆柄锈菌以及玉米叶片的DNA含量.为玉米南方锈病的早期检测和预测预报提供了科学合理的技术手段,并能够为该病害的早期防治提供参考依据.
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