【摘 要】
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本研究比较了含有3种不同异源的启动子表达载体在玉米丝黑穗菌中分别表达eGFP及RFP效果。将异源启动子otef、hsp70(莴苣霜霉菌的hsp70基因)启动子和mig2-5(玉米黑粉菌mig2-5
【机 构】
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吉林省农业科学院; 吉林大学植物科学学院; 吉林大学生命科学学院;
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本研究比较了含有3种不同异源的启动子表达载体在玉米丝黑穗菌中分别表达eGFP及RFP效果。将异源启动子otef、hsp70(莴苣霜霉菌的hsp70基因)启动子和mig2-5(玉米黑粉菌mig2-5基因)启动子与eGFP连接构建真核表达载体;以构建成功的含异源启动子的eGFP的表达载体为基体构建含异源启动子的RFP的表达载体。利用原生质体遗传转化法,将构建成功的表达载体转入玉米丝黑穗菌菌株内,将转化成功的菌株进行玉米侵染实验,观察eGFP及RFP在玉米植株内的表达情况。通过倒置荧光显微镜观察,3种异源启动子均能使eGFP及RFP在玉米丝黑穗菌菌株内正常表达,且荧光性稳定,但表达强度均不如含mig2-5启动子的转化菌株;当玉米叶片出现病斑时,运用倒置荧光显微镜,我们发现3种异源启动子均能够诱导eGFP及RFP在玉米植株内表达,并且在无病斑的叶片部位也能够观察到绿色荧光蛋白及红色荧光蛋白的表达,进而观察到玉米丝黑穗菌在玉米植株内的分布情况。含mig2-5启动子的转化菌株诱导eGFP及RFP在玉米植株内的表达强度明显高于含otef、hsp70启动子的转化菌株。通过本研究得到了能够诱导eGFP及RFP在玉米丝黑穗菌中及侵染后在玉米植株中均能够高效表达的mig2-5启动子。
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