【摘 要】
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马立克氏病病毒(MDV)编码一种病毒性趋化因子--类白细胞介素8(vIL8),其在致病致瘤中的作用尚不完全明了.本研究通过PCR方法克隆了vIL8 5端潜在的启动子片段,构建不同长度的vI
【机 构】
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江苏省动物预防医学重点实验室,扬州大学,江苏扬州,225009
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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马立克氏病病毒(MDV)编码一种病毒性趋化因子--类白细胞介素8(vIL8),其在致病致瘤中的作用尚不完全明了.本研究通过PCR方法克隆了vIL8 5端潜在的启动子片段,构建不同长度的vIL8启动子控制下的pGL3-LUC表达载体,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)、鸡胚法氏囊细胞(CEB),并利用荧光素酶检测系统检测启动子的活性,分析病毒对vIL8的调控作用。
结果表明:本研究成功克隆出vIL8启动子(-1362～+81)片段,并通过PCR方法克隆出不同大小片段(-1336～+10,-1094～+10,-882～+10,-630～+10,-470～+10,-176～+10)的调控序列,成功构建了6个pGL3/vIL8启动子报告基因表达载体；重组表达载体转染实验表明,vIL8启动子在CEF和CEB中均有活性,但在两种细胞中启动子活性有所差异,-470～+10片段在CEB中相对活性迭23.2,但在CEF中相对活性近于0,提示在-470～-176区域存在淋巴组织特异性的转录调节元件结合区,vIL8基因的启动子具有淋巴组织特异性。这为深入研究vIL8转录表达的调控机制进而揭示vIL8在MDV致病致瘤中的功能提供了理论依据。
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