【摘 要】
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刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)可引起包括石斑鱼在内的大多数海水鱼"白点病"的发生,流行范围广、死亡率高,严重制约了海水鱼产业的可持续发展.刺激隐核虫生活史主要分为滋养体期、包囊期、纤毛幼虫期三个阶段,其中以纤毛幼虫期感染力最强.抑动蛋白位于纤毛幼虫表面,感染耐受过的鱼血清和体表黏膜抗体可识别抑动蛋白,通过抑动、凝集刺激隐核虫幼虫阻断其对鱼体的侵染.本研究通过对刺激隐核虫滋
【机 构】
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集美大学水产学院,福建厦门 361021 福建农林大学动物科学学院水产系,福建福州 350002
【出 处】
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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛
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刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)可引起包括石斑鱼在内的大多数海水鱼"白点病"的发生,流行范围广、死亡率高,严重制约了海水鱼产业的可持续发展.刺激隐核虫生活史主要分为滋养体期、包囊期、纤毛幼虫期三个阶段,其中以纤毛幼虫期感染力最强.抑动蛋白位于纤毛幼虫表面,感染耐受过的鱼血清和体表黏膜抗体可识别抑动蛋白,通过抑动、凝集刺激隐核虫幼虫阻断其对鱼体的侵染.本研究通过对刺激隐核虫滋养体期、包囊期、纤毛幼虫期的转录组进行比较与分析,筛选出了多个纤毛幼虫期特异表达的抑动蛋白编码基因,并对其进行克隆和表达分析,以期获得刺激隐核虫抑动蛋白疫苗候选分子.实验结果表明：其中一条刺激隐核虫抑动蛋白基因cDNA全长序列为1153 bp,开放阅读框为987 bp,编码329个氨基酸,蛋白分子量为34.6 kD.通过对该蛋白分子的抗原决定簇分析后,选择长度为849 bp、编码强免疫原性蛋白分子的基因序列进行克隆,并与pET30A质粒连接构建具有6个HIS标签的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达.表达产物经SDSG-PAGE分析表明新增的30 kD蛋白条带与预期值相符,通过结合His标签柱亲和层析,经透析复性后获得了高纯度可溶性重组抑动蛋白,这一结果可用于进一步的免疫原性分析及其对石斑鱼免疫保护率的研究.
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