【摘 要】
：
环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),是2000年才发明的一种新的核酸扩增方法,具有灵敏度高、特异性强、成本低等特点,适合基层、养殖户及进出口检疫等对病原基因的快速诊断。短短几年,LAMP技术已成功地应用于SAILS、流感、乙肝等疾病的检测中.猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classi
【机 构】
：
中国兽医药品监察所 猪瘟参考实验室,北京,100081
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
论文部分内容阅读
环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),是2000年才发明的一种新的核酸扩增方法,具有灵敏度高、特异性强、成本低等特点,适合基层、养殖户及进出口检疫等对病原基因的快速诊断。短短几年,LAMP技术已成功地应用于SAILS、流感、乙肝等疾病的检测中.猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Firus,CSFV)引起的猪的高度接触性传染病。近年来,一些已宣布消灭了猪瘟的国家和地区又先后出现了猪瘟的复发。在我国,猪瘟的发病率亦呈上升趋势,且自然病例中常见非典型、温和型或亚急性症状CSFV持续性感染,妊娠母猪带毒综合征以及新生仔猪的免疫耐受等,严重制约了养猪业的发展。针对猪瘟流行的新特点,要求更灵敏、特异、简便的方法对猪瘟病毒做出快速准确的诊断。为此,本文对猪瘟病毒RT-LAMP快速诊断方法的研究情况进行了论述。
其他文献
将构建的携带FMDV衣壳蛋白P1-2A基因和蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及编码FMDVP1-2A基因和猪IL-18基因的重组DNA疫苗pVIRIL18P1,分别以单独和混合的方式给豚鼠进行2次免疫,然后测定FMDV特异性结合抗体、中和抗体和T淋巴细胞增殖反应,并用250ID50的FMDV进行攻击,观察其保护效果.结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导豚鼠产生特异性的体液免
附红细胞体(Eperythrozoon)是一种专性血液寄生生物,寄生于人畜红细胞表面及血浆中,引起人畜共患传染的附红细胞体病.目前,附红细胞体病广泛存在于世界各地,但对病原的分类地位至今尚有争议.弄清附红细胞体的超微结构形态及分类地位对疾病的发生及控制均有重要的理论和实际意义.本文主要是对目前国内外研究进展进行探讨。
热应激是影响畜禽夏季生产性能的主要因素之一,造成动物的激素分泌、心血管系统以及新陈代谢紊乱、免疫内分泌失调等,同时也是爆发畜禽各种传染病的诱因.本试验将通过检测热应激后猪血清中的IL-2、IFN-γ及TNF-α水平,通过其变化规律来从分子水平探讨热应激对机体免疫功能的影响.将12头体重基本一致的3月龄中国试验用小型猪随机分成两组,高温实验组和常温对照组.高温实验组在人工气候仓内饲养,模拟夏季炎热气
本研究从广东省两个发生呼吸道病的猪场送检的病料和棉签拭子中分离到两株病毒,经初步鉴定为SIV.病毒纯化后进行HA及NA亚型的鉴定,结果两株病毒均为H3N2亚型毒株,分别命名为A/Swine/Guangdong/1/2003(H3N2)(以下简称为SGD2)和A/Swine/Guangdong/2/2003(H3N2)).SGD2株生物学特性方面的研究结果表明,病毒的组织培养半数感染量(TCID50
根据GenBank公布的伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)编码gE的基因序列特点,利用DNAStar及PrimerPremer专业软件分析并设计了一对引物,扩增出PRV-SHgE主要抗原表位基因区段(660bp),构建了分泌表达载体pPICZaC-pgE,经电转化整合入巴斯德毕赤酵母野生型菌株X-33,经筛选、诱导表达,获得重组酵母工程菌X-33/pPICZaC-pgE,使gE主要抗原表位基因在酵
将构建好的重组质粒PET-VP2转化宿主菌BL21,利用IPTG(1mmol/L)诱导实现了PPVVP2基因的高效表达.通过Western-blot检测证明表达的重组蛋白具有良好的免疫学活性.表达产物经HisBind层析柱纯化后作为诊断抗原初步建立了检测PPV抗体的间接ELISA方法.结果表明:抗原的最佳包被浓度为3.5μg/ml,血清的最佳稀释度为1:40,待检血清阳性标准初步定为OD490＞0
根据猪瘟病毒株广东流行株序列,设计一对引物,并以包含E2全基因组的重组质粒pMD-E2为模板,扩增出含E2基因的主要抗原区域(360bp),回收PCR产物,将其克隆入pET-Trx的BamHⅠ和NheI位点间,构建原核表达质粒pET-E2,阳性重组质粒转化E.coliBL21(DE3)plyS,进行原核表达.表达蛋白质有少部分是以可溶形式存在,利用镍离子金属整合亲合层析法对可溶部分进行纯化.结果获
应用PCR方法对从山东省不同地区采集的253份猪传染性胸膜肺炎肺脏和125份临床健康猪肺脏进行PCV-2和PRRSV的检测.结果,在传染性胸膜肺炎肺脏中,171份为PCV-2阳性,阳性率达67.5％;101份样品为PRRSV阳性,阳性率达40％;其中,68份样品同时检出PCV和PRRSV,共感染的阳性率达26.8％.而临床健康猪肺组织中,21份样品PCV-2检测结果为阳性,阳性率为16.8％;12
构建了表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白的重组DNA质粒pcDNA3.1(+)-orf2,并在哺乳动物表达系统COS7细胞中进行了瞬时表达,RT-PCR和间接免疫荧光均证明了所构建的重组质粒能够正确表达PCV2衣壳蛋白.用重组质粒pcDNA3.1(+)-orf经肌肉注射途径免疫Balb/c小鼠,结果表明,首免疫后7d,免疫小鼠血清中即可检测到特异性抗体,阳性率为40％(4/10),三免后14d
采用PCR方法对采自广西各地二十年(1986～2006)来,63个猪场(养殖户)的490份疑似猪瘟病料,进行CSFV、PRRSV、PCV、附红细胞体、细菌等病原的检测.结果发现广西猪瘟主要发生在中小猪场,呈混合感染;断奶仔猪多发,且多与免疫抑制病混合感染,严重干扰猪瘟疫苗的免疫效果.通过30个CSFV流行株E2基因的扩增和序列比较分析,发现广西CSFV流行株为基因Ⅰ、Ⅱ群,未发现基因Ⅲ群,其中基因