目的 前期的研究证明电压依赖性钙离子通道亚单位α 2δ 1 能够识别多种肿瘤起始细胞,并能够维持干性的特征。但是α 2δ 1 对于胰腺癌肿瘤细胞干性特征的调控并没有深入的研究,因此本研究的目的是探讨α 2δ 1 调控钙离子内流造成的一系列的与钙调控有关的蛋白,尤其是钙调节蛋白CAMK2D 在胰腺癌肿瘤干性维持中的作用机制,以其发现胰腺癌干性调控的新的靶点,并进行肿瘤干预。方法 流式细胞分选鉴定α 2δ 1 阳性和阴性的细胞群；成球实验验证细胞的自我更新能力,体内外致瘤性和连续传代能力；流式细胞检测细胞分化能力；RT-PCR 和Western blot 分析干性基因和蛋白的表达,CDX 和PDX NODSCID 小鼠模型验证α 2δ 1 的中和抗体1B501 联合吉西他滨的治疗效果；测序和数据库分析得到α 2δ 1 下游调控靶点CAMK2D；质谱分析和CO-IP 验证CAMK2D 的复合物为PKM2；shRNA 和Y105 位点突变的病毒感染胰腺癌细胞系,用以证明Y105 位点磷酸化的有效性；免疫荧光检测PKM2 磷酸化的入核状态等等。结果 利用肿瘤起始细胞表面标志物α 2δ 1,分离得到不同的胰腺癌细胞和PDX 亚克隆细胞群,对α 2δ 1 表达阳性和阴性的细胞群进行干细胞特性的分类及分析,如细胞的自我更新能力,体内外致瘤性和连续传代能力,细胞分化以及干性基因和蛋白的表达,发现α 2δ 1 能够很好的识别胰腺癌肿瘤起始细胞,并证明比已知的其他干细胞表面标志物EpCAM,CD44,DCLK 都更有效。临床病例分析显示癌旁组织α 2δ 1 表达阳性是胰腺癌预后的独立因素,并且和肿瘤的细胞转移和浸润相关。通过测序和数据库分析,发现α 2δ 1 有效的调控CAMK2D 的蛋白表达,同时验证了CAMK2D 过表和敲低细胞的干性特征与α 2δ 1 表达的高低相一致。进一步质谱检验结果 显示CAMK2D 与PKM2形成的复合物能够持续激活肿瘤干性蛋白的表达,这种调控与PKM2 Y105 位点的磷酸化及PKM2 入核调控有关。动物实验结果 证明α 2δ 1 的中和抗体1B501 联合吉西他滨可以有效的抑制肿瘤的生长,并对吉西他滨耐药的肿瘤细胞有持续性的抑制作用,同时延长动物的生存期。结论 综上所述,α 2δ 1 是一个高效识别胰腺肿瘤起始细胞的干细胞标志物,其中和抗体1B50-1可以有效的抑制肿瘤的生长和转移,更好的参与吉西他滨的治疗效果。这些表现与CAMK2D 的表达和PKM2 Y105 位点的磷酸化呈正向相关调控,因此,我们提出了α 2δ 1/CAMK2/PKM2 的肿瘤干性调控轴的新理论,进一步丰富了胰腺癌肿瘤起始细胞干性维持的机制。