沉默survivin异变体对Jurkat细胞凋亡的影响

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pluto_jelly
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目的:探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法:构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果:RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P<0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)%,未转染组为(12.96±0.31)%,阴性对照组为(9.24±0.28)%(F=15.37,P<0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)%,而未转染组为(13.62±0.57)%,阴性对照组为(19.58±1.03)%(F=19.75,P<0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)%,阴性对照组为(16.55±0.82)%,未转染组为(19.48±1.07)%(F=31.68,P<0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)%,阴性对照组为(25.72±1.51)%,未转染组为(18.74±0.91)%(F=25.39,P<0.05).结论:抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.
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