【摘 要】
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目的 制备兔抗信号转导及转录激活因子3(Stat3)抗体,分析其在乳腺癌诊断中的价值.方法:应用人工重组小鼠Stat3蛋白,常规免疫雄性家兔制备抗Stat3抗体.用免疫印迹法检测Stat3
【机 构】
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河北医科大学第四医院科研中心(河北石家庄)
【出 处】
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肿瘤免疫生物治疗国际研讨会暨河北省免疫学会第四届第一次学术年会
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目的 制备兔抗信号转导及转录激活因子3(Stat3)抗体,分析其在乳腺癌诊断中的价值.方法:应用人工重组小鼠Stat3蛋白,常规免疫雄性家兔制备抗Stat3抗体.用免疫印迹法检测Stat3抗体的纯度和特异性.应用免疫组化染色法,检测乳腺组织中Stat3蛋白的表达.结果:用重组小鼠Stat3蛋白免疫家兔.6W后,静脉血中抗Stat3抗体效价为>1:256,000(A450=0.40).将Stat3蛋白经SDS-PAGE分离,可见1条相对分子质量(Mr)为92,000的蛋白条带,与理论值相符.用抗Stat3血清做免疫印迹证实,于92,000处有明显的条带,证明是抗Stat3特异性抗体.乳腺组织切片经Stat3抗体免疫组化染色,Stat3在正常乳腺组织细胞胞浆中呈棕黄色云雾状,胞核不着色或着色很浅.而在低分化的乳腺癌组织中癌细胞胞浆Stat3被染色呈棕色云雾状,在胞核则呈深棕色颗粒状,在高分化乳腺癌组织的癌细胞中胞浆呈棕黄色云雾状,胞核呈棕色颗粒状.结论:制备了高效价特异性的兔抗Stat3抗体,用该抗体检测乳腺癌组织Stat3表达情况提示,组织学分级与胞核Stat3的量呈正相关,与胞浆Stat3的量成正相关,胞核与胞浆呈正相关.Stat3抗体可用于乳腺癌的早期临床诊断和判断预后.
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